[发明专利]用于体外扩增造血干细胞和祖细胞的方法

权利要求书

1.一种延长HPC和/或HSC群体的体外成活力、或者培养或扩增HPC和/或HSC群体的方法，所述方法包括在ficolin-1、ficolin-2、ficolin-3或它们的片段或功能等价物中的至少一种的存在下培养所述HPC和/或HSC群体。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述HPC和/或HSC的更新能力和/或多能性被维持或提高。

3.根据权利要求1或权利要求2所述的方法，其中进一步在氧气浓度低于正常环境氧浓度的环境中培养所述HSC和/或HPC。

4.根据权利要求1～3中任一项所述的方法，其中在约50ng/ml～200ng/ml范围浓度的至少一种ficolin-1、ficolin-2、ficolin-3及它们的片段或功能等价物的存在下培养所述HSC和/或HPC。

5.根据权利要求4所述的方法，其中在ficolin-1或其片段或功能等价物的存在下培养所述HSC和/或HPC。

6.根据权利要求3～5中任一项所述的方法，其中氧的浓度低于约20％。

7.根据权利要求3～6中任一项所述的方法，其中氧的浓度低于约12％。

8.根据权利要求3～7中任一项所述的方法，其中氧的浓度为约5％～10％。

9.根据权利要求3～8中任一项所述的方法，其中氧的浓度为约5％。

10.根据权利要求1～9中任一项所述的方法，其中在从包含白细胞介素3、白细胞介素6和白细胞介素11、干细胞因子、干细胞配体、FLT-3配体和血小板生成素的群组中选出的生长因子的存在下培养所述HSC和/或HPC。

11.根据权利要求1～10中任一项所述的方法，其中在生长因子血小板生成素、干细胞因子、Flt-3配体和白细胞介素6的存在下培养所述HSC和/或HPC。

12.根据权利要求10或权利要求11所的方法，其中以约50ng/mL～100ng/mL的浓度提供所述生长因子。

13.根据权利要求11所述的方法，其中以约50ng/mL提供血小板生成素，以约50ng/mL提供干细胞因子，以约80ng/mL提供Flt-3配体且以约100ng/mL提供白细胞介素6。

14.根据权利要求1～13中任一项所述的方法，其中培养所述HPC以相对于初始的HPC数量增加HPC的数量以生产第二量的HPC。

15.根据权利要求14所述的方法，其中将所述第二量的HPC分离并且进一步培养于单独的培养基中。

16.根据权利要求15所述的方法，其中所述单独的培养基含有从包含白细胞介素3、白细胞介素6和白细胞介素11、干细胞因子、干细胞配体、FLT-3配体和血小板生成素的群组中选出的生长因子，所述生长因子促进HPC的维持、扩增和/或分化，从而生产造血源分化细胞。

17.根据权利要求16所述的方法，其中所述培养基包括接种的基质细胞和/或为基质细胞条件培养基。

18.根据权利要求1～17中任一项所述的方法，其中在HPC和/或HSC的扩增和/或分化之前，将HPC培养6～8周的时间。

19.根据权利要求1～18中任一项所述的方法，其中所述HSC获自于从包含未分级的骨髓、脐带、外周血、肝脏、胸腺、淋巴和脾脏的群组中选出的血液制品。

20.一种用于延长培养物中的HSC和/或HPC的体外成活力的培养基，其包括从包含白细胞介素3、白细胞介素6和白细胞介素11、干细胞因子、干细胞配体、FLT-3配体和血小板生成素的群组中选出的造血生长因子以及至少一种用于增强HSC或HPC的自我更新和/或抑制HSC或HPC的分化的试剂。

21.根据权利要求20所述的培养基，其中所述试剂选自于由ficolin-1、ficolin-2、ficolin-3、和它们的片段或功能等价物所构成的群组。

22.根据权利要求21所述的培养基，其中所述ficolin-1、ficolin-2、ficolin-3、或它们的片段或功能等价物以约50ng/ml～200ng/ml范围的浓度存在。