[发明专利]二氧化硅球状体及亲和载体

说明书

技术领域

本发明涉及一种二氧化硅球状体及亲和载体。

背景技术

近年，高精度地纯化或除去特定的蛋白质在医药领域以及医疗领域中得到了重视。例如，在纯化具有特定功能的药物的情况下，需要高精度地纯化特定的蛋白质。

亲和色谱法广泛使用作为配体有特异结合性的A蛋白。A蛋白是来源于作为革兰氏阳性球菌的真细菌葡萄球菌(Staphylococcus)的蛋白质，具有与来源于各种动物的IgG的Fc区域特异结合的性质，广泛使用于IgG的纯化。众所周知将A蛋白固定于不溶性载体上，通过使用该不溶性载体的亲和色谱法特异地分离纯化IgG的方法。

在亲和色谱法中使用的亲和载体中，通常，使称为连接物(日文：リンカー)的结构介于不溶性载体和配体之间，使连接物的一端与载体结合，并且使连接物的另一端与配体结合，以此将配体固定在不溶性载体上(专利文献1)。

专利文献2中，提出了通过含有具有大于小于的细孔径以及大于55μm小于70μm的平均粒径的二氧化硅粒子的、适于亲和色谱法的实施的固相载体，提供一种具有改善了的动态容量、在更短的滞留时间下的大流量的色谱法。然而，在专利文献2中，如果为了增多二氧化硅粒子的填充量而减小平均二氧化硅粒径则存在压力损失上升的问题，如果压力损失高则线流速的上限受到限制。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：日本专利特开2011-1336号公报

专利文献2：日本专利特开2009-31277号公报

发明内容

发明所要解决的技术问题

本发明的目的是提供一种即使在流通溶液的线流速快的情况下压力损失也小、结合容量大的亲和载体。

解决技术问题所采用的技术方案

本发明的一个方面为一种二氧化硅球状体，其特征在于，(a)利用激光式光散射法的测定方法中，平均粒径为30μm～40μm；(b)利用库尔特计数法的测定方法中，粒径分布的体积换算的累积量从较小侧开始10％的粒径(D10)与90％的粒子径(D90)之比(D10/D90)在1.50以下；(c)利用水银压入法的测定方法中，平均细孔径在85nm～115nm的范围内，细孔容积在1.5mL/g以上。

本发明的另一方面为一种亲和载体，其特征在于，含有所述的二氧化硅球状体，配体固定于所述的二氧化硅球状体上。

发明的效果

如果采用本发明，可提供一种即使在流通溶液的线流速快的情况下压力损失也小、结合容量大的亲和载体。

附图说明

图1是本发明的一实施方式的乳化装置的简要剖视图。

图2是表示实施例以及比较例的柱的线流速和压力损失的关系的图。

图3是表示实施例以及比较例的柱的滞留时间和动态结合容量的关系的图。

具体实施方式

以下对本发明的实施方式进行说明，但本发明不受本实施方式中例示的限定。

本发明的一实施方式的二氧化硅球状体的特征在于，(a)利用激光式光散射法的测定方法中，平均粒径为30μm～40μm；(b)利用库尔特计数法的测定方法中，粒径分布的体积换算的累积量从较小侧开始10％的粒径(D10)与90％的粒子径(D90)之比(D10/D90)在1.50以下；(c)利用水银压入法的测定方法中，平均细孔径在85nm～115nm的范围内，细孔容积在1.5mL/g以上。如果采用这样的二氧化硅球状体，可提供一种即使在流通溶液的线流速快的情况下压力损失也小、结合容量大的亲和载体。

如果是相同体积的柱，虽然认为使用平均粒径更小的二氧化硅球状体的一方由于单位二氧化硅球状体的有效容积增加，因而单位载体的作为抗体分子(蛋白质等)结合能力的结合容量增大，但另一方面也有压力损失变高的问题。如果采用本发明，通过使用具备特定的小平均粒径，并且上述(D10/D90)的比例小的二氧化硅球状体、即粒径分布尖锐(日文：シャープ)的二氧化硅球状体，可提供低压力损失且高容量的亲和载体。

另一方面，作为亲和载体的基材，如果使用琼脂糖或聚甲基丙烯酸酯等树脂类填充剂，由于其柔软性，压力损失容易变高，特别是高线流速下压力损失容易变高。此外，作为亲和载体的基材，如果使用粉碎状的玻璃或陶瓷，由于其形状的原因，压力损失容易变高。