[发明专利]变体成麦芽六糖α-淀粉酶变体在审

专利信息
申请号: 201280052976.2 申请日: 2012-10-26
公开(公告)号: CN103917642A 公开(公告)日: 2014-07-09
发明(设计)人: L·G·卡斯康-佩雷拉;D·A·埃斯特尔;M·科尔克曼;H·穆尔德 申请(专利权)人: 丹尼斯科美国公司
主分类号: C12N9/24 分类号: C12N9/24;C11D3/386
代理公司: 北京市中咨律师事务所 11247 代理人: 黄革生;林柏楠
地址: 美国加利*** 国省代码: 美国;US
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摘要:
搜索关键词: 变体 麦芽 淀粉酶
【权利要求书】:

1.一种衍生自亲本α-淀粉酶多肽的变体α-淀粉酶多肽,所述变体α-淀粉酶多肽在有效氨基酸位置处包含至少一个可组合突变;其中:

(i)所述可组合突变是用一不同的氨基酸残基置换所述亲本淀粉酶中存在的氨基酸残基,与所述亲本α-淀粉酶相比,所述置换可改善所述变体α-淀粉酶的至少一种期望的特性,而与所述亲本α-淀粉酶相比,未显著降低所述变体α-淀粉酶的表达、活性或稳定性,

(ii)所述有效位置是可用多个不同的氨基酸残基置换的氨基酸位置,所述置换的每一者可导致符合(i)的要求的变体α-淀粉酶,并且

(iii)所述可组合突变对应于列表A、B、C或D中或表C或D中列出的突变,所述列表和表使用SEQ ID NO:3进行编号。

2.根据权利要求1所述的变体淀粉酶,其中所述可组合突变产生变体淀粉酶,其中关于(i)蛋白质表达、(ii)活性和(iii)洗涤剂稳定性或热稳定性,相对于所述亲本淀粉酶的最低性能指数(PI)大于或等于0.9,并且关于(i)、(ii)或(iii)中的任一者的所述PI大于或等于1.0。

3.根据权利要求1所述的变体淀粉酶,其中所述可组合突变产生变体淀粉酶,其中关于(i)蛋白质表达、(ii)活性和(iii)洗涤剂稳定性或热稳定性,相对于所述亲本淀粉酶的最低性能指数(PI)大于或等于0.8,并且关于(i)、(ii)或(iii)中的任一者的所述PI大于或等于1.2。

4.根据权利要求1所述的变体淀粉酶,其中所述可组合突变产生变体淀粉酶,其中关于(i)蛋白质表达、(ii)活性和(iii)洗涤剂稳定性或热稳定性,相对于所述亲本淀粉酶的最低性能指数(PI)大于或等于0.5,并且关于(i)、(ii)或(iii)中的任一者的所述PI大于或等于1.5。

5.根据前述权利要求任一项所述的变体淀粉酶,其中所述可组合突变具有适宜性得分+++、++++或+++++,参见表B。

6.根据前述权利要求任一项所述的变体淀粉酶,其中所述可组合突变具有适宜性得分++++或+++++,参见表B。

7.根据前述权利要求任一项所述的变体淀粉酶,其中所述可组合突变具有适宜性得分+++++,参见表B。

8.根据前述权利要求任一项所述的变体淀粉酶,其中所述可组合突变具有有效性得分1或2。

9.根据前述权利要求任一项所述的变体淀粉酶,所述变体淀粉酶具有多个可组合突变。

10.根据前述权利要求任一项所述的变体淀粉酶,所述变体淀粉酶还包含对应于选自Arg-181、Gly-182、His-183和Gly-184的残基的缺失,所述残基使用SEQ ID NO:3进行编号。

11.根据前述权利要求任一项所述的变体淀粉酶,所述变体淀粉酶还包含对应于残基Arg-181和Gly-182的缺失,所述残基使用SEQ ID NO:3进行编号。

12.根据前述权利要求任一项所述的变体淀粉酶,其中所述亲本α-淀粉酶或所述变体α-淀粉酶与SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:4的氨基酸序列具有至少60%的氨基酸序列同一性,或者其中所述亲本α-淀粉酶或所述变体α-淀粉酶由在严格条件下与SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:5的核酸杂交的核酸编码。

13.根据前述权利要求任一项所述的变体淀粉酶,其中所述亲本α-淀粉酶或所述变体α-淀粉酶与SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:4的氨基酸序列具有至少70%的氨基酸序列同一性,或者其中所述亲本α-淀粉酶或所述变体α-淀粉酶由在严格条件下与SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:5的核酸杂交的核酸编码。

14.根据前述权利要求任一项所述的变体淀粉酶,其中所述亲本α-淀粉酶或所述变体α-淀粉酶与SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:4的氨基酸序列具有至少80%的氨基酸序列同一性,或者其中所述亲本α-淀粉酶或所述变体α-淀粉酶由在严格条件下与SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:5的核酸杂交的核酸编码。

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