[发明专利]用突变体BaEV糖蛋白假型化的慢病毒载体

权利要求书

1.用于将生物材料转移到细胞中的假型化病毒载体颗粒，其中所述载体颗粒至少包含：

-嵌合包膜糖蛋白，其包含或由狒狒内源性逆转录病毒(BaEV)包膜糖蛋白的跨膜和胞外结构域与鼠白血病病毒(MLV)包膜糖蛋白的胞质尾结构域的融合体组成；或

-修饰的BaEV包膜糖蛋白，其中胞质尾结构域缺乏融合抑制性R肽。

2.根据权利要求1所述的假型化病毒载体颗粒，其中所述病毒载体颗粒是慢病毒载体颗粒。

3.根据权利要求2所述的假型化病毒载体颗粒，其中所述慢病毒载体颗粒选自HIV和SIV。

4.根据权利要求1-3任一项所述的假型化病毒载体颗粒，其中所述生物材料是一种或多种核酸。

5.根据权利要求1-4任一项所述的假型化病毒载体颗粒，其中所述病毒载体颗粒进一步显示至少一种选自干细胞因子(SCF)、血小板生成素(TPO)、IL-2、IL-15和IL-7的细胞因子。

6.根据权利要求1-5任一项所述的假型化病毒载体颗粒，其中所述假型化病毒载体颗粒意欲用于将生物材料转移入造血细胞。

7.根据权利要求1-6任一项所述的假型化病毒载体颗粒，其用于治疗造血功能障碍或自身免疫性疾病。

8.根据权利要求7所述的假型化病毒载体颗粒的用途，其中所述造血功能障碍选自范可尼贫血、血友病、β-地中海贫血、Wiskott-Aldrich综合征、X-连锁重症联合免疫缺陷、腺苷脱氨酶缺乏症、慢性肉芽肿病和肾上腺脑白质营养不良。

9.用于产生假型化病毒载体颗粒的方法，其包括

a)用以下物质转染细胞以得到生产细胞：

(i)至少一种第一核酸序列，包含具有包装能力的逆转录病毒衍生的基因组；

(ii)至少一种第二核酸序列，包含编码来自所述逆转录病毒的核心蛋白的cDNA，和

(iii)至少一种第三核酸序列，包含编码以下的cDNA：

-嵌合包膜糖蛋白，包含或由狒狒内源性逆转录病毒(BaEV)包膜糖蛋白的跨膜和胞外结构域与鼠白血病病毒(MLV)包膜糖蛋白的胞质尾结构域的融合体组成，如上所定义；或

-修饰的BaEV包膜糖蛋白，其中胞质尾结构域缺乏融合抑制性R肽，如上所定义；

b)将所述生产细胞在培养物中维持足够时间，以允许表达cDNA以产生编码蛋白；和

c)允许编码蛋白形成假型化病毒载体颗粒。

10.药物，其包含作为活性成分的如权利要求1-5任一项中定义的假型化病毒载体颗粒。

11.如权利要求1-5任一项中定义的假型化病毒载体颗粒用于将生物材料离体转移到造血细胞中的用途。

12.用于转导造血细胞的方法，其包括在实现通过所述假型化病毒载体颗粒转导所述造血细胞的条件下将所述造血细胞与如权利要求1-5任一项中定义的假型化病毒载体颗粒接触。

13.根据权利要求12所述的方法，其中所述造血细胞选自造血干细胞、CD34⁺祖细胞、非常早期CD34⁺祖细胞、B细胞CD19⁺祖细胞、髓样CD13⁺祖细胞、T淋巴细胞、B淋巴细胞、单核细胞、树突状细胞、外周血CD34⁺细胞、癌B细胞(BCLL)、边缘区淋巴瘤(MZL)B细胞和胸腺细胞。

14.根据权利要求13所述的方法，其中所述造血细胞不用至少一种细胞因子预刺激。

15.稳定的病毒包装细胞系，其产生如权利要求1-5任一项中定义的假型化病毒载体颗粒。