[发明专利]用于检测样品中的分析物的方法和系统

说明书

相关申请的交叉引用

根据35U.S.C.§119(e)，本申请案要求2011年11月16日提交的美国临时专利申请序列号61/560,752的提交日期的优先权；将该申请案的披露通过引用结合于此。

简介

定点照护(point-of-care，POC)测试协助疾病的诊断，尤其是在医疗保健公共设施薄弱的资源受限的环境中，并且质量和及时的医疗护理的获得是一个挑战。POC测试常常提供快速的结果，允许及时启动适当的治疗。重要地，POC测试可以常常足以简单的而可在初级护理水平上使用，并且可用在具有很少至没有实验室公共设施的远程环境中。因此，POC测试提供了超过其他类型测定的某些优点，例如基于流式细胞术的微粒免疫测定，这提供了高的准确性和多路复用，但由于繁琐的样品制备和昂贵的仪器对于POC环境常常是不适当的。

例如，POC测试协助HIV/AIDS的诊断或治疗。在大多数资源受限制的国家中，对于HIV/AIDS的抗逆转录病毒疗法的合格性是基于CD4+T-淋巴细胞的计数。传统的CD4计数技术要求静脉血样品由实验室处理。在对于HIV感染的测试阳性之后，患者立即提供血液样品，或如果HIV咨询和测试地点不取血液样品则求助于另一机构。然后将血液样品送至实验室，以用于处理使用，例如基于流式细胞术的测定。取决于实验室能力，在患者已经提供样品之后，结果典型地获得于2天与14天之间。患者被要求返回诊所，以接收他们的结果，在此之后，他们可以就未来的HIV护理和/或治疗受到建议。然后，在此类环境中大约40％的患者不提供血液样品或不返回至诊所来获得他们的结果。在患者仍然处于临床环境中时，POC测试可以通过简化血液收集过程并且通过使这些结果可获得来协助HIV/AIDS的诊断。另外，POC测试可以有潜力地允许此类患者在他们家的隐私中进行自我测试，尤其是用于受非难的疾病例如HIV/AIDS。

对感染性疾病的大多数POC测试对于每个测试仅提供单个诊断。近来，多路复用的POC测试已经得以开发，例如POC测试(MedMira公司，NS，加拿大)。多路复用的POC测试可以原则上诊断多重感染性疾病，由此提供多个病症(例如，HIV、乙型和丙型肝炎、梅毒等)的同时检测的希望，并对患者和提供者具有更大的便利性。然而，当前，在现实世界环境中它们的性能的证据是有限的。使用在定点照护时可获得的廉价且容易的技术，从单个样品(例如，单个手指针刺血滴)中对多重感染性疾病的快速诊断会大大改进全球健康结果。

概述

本披露提供了用于对一个样品中一种或多种分析物进行检测的方法。这些方法的方面包括使一个样品(例如，一种生物样品，例如血液或血液产品)流经一个通道，该通道包括与其表面稳定缔合的一个分析物特异性捕获域，其中该捕获域包括针对一种分析物展示一种特异性结合成员的颗粒；并且对该分析特异性捕获域进行成像以检测该分析物是否存在于该样品中。还提供了可以在实践这些主题方法中使用的系统、装置以及试剂盒。这些方法和组合物发现在各种不同应用中可使用，包括诊断性应用、环境测试应用等。

本披露提供了用于检测分析物是否存在于样品中的方法，这些方法包括使该样品流经一个毛细管通道，该毛细管通道包括在一个已知位置处与其内表面稳定缔合的一个分析物特异性捕获域，其中该分析物特异性捕获域包括在其表面上对于该分析物展示一种特异性结合成员的颗粒；并且对该分析物特异性捕获域进行成像以检测该分析物是否存在于该样品中。感兴趣的颗粒包括但不限于珠粒(例如，对于分析物展示特异性结合成员的捕获珠粒)、抗体和其抗原结合片段、核苷酸序列等等。

本披露还提供了用于检测多个分析物(例如，2个或更多个分析物，例如，大约3至5个分析物，大约5至8个分析物，大约8至12个分析物，等)是否存在于样品中的方法。例如，为了检测第一和第二分析物，这些方法可以包括使该样品流经一个毛细管通道，该毛细管通道包括在一个已知位置处与其内表面稳定缔合的第一和第二分析物特异性捕获域，其中该第一分析物特异性捕获域包括在其表面上对于该第一分析物展示一种特异性结合成员的颗粒，并且其中该第二分析物特异性捕获域包括在其表面上对于该第二分析物展示特异性结合成员的颗粒；并且对该第一和第二分析物特异性捕获域进行成像，以检测该第一和第二分析物是否存在于该样品中。第一和第二结合成员域可以位于在毛细管通道中的不同位置处。此类方法可以被适配为通过例如添加针对于那种分析物的第三、第四、第五等等分析物特异性捕获域来检测第三、第四、第五等等分析物是否存在于样品中。