[发明专利]增加从流体样品中所回收的靶细胞的数量的方法

权利要求书

1.一种增加来自含有细胞的流体样品中的靶细胞的数量的方法，所述方法包括：

a)提供包括一个或多个靶细胞的过滤器，所述一个或多个靶细胞通过样品穿过包括所述过滤器的过滤装置而从流体含有靶细胞和非靶细胞的样品中获得，其中，过滤器中的孔的尺寸导致靶细胞保留在所述过滤器上或中；以及

b)在具有免疫缺陷的非人类动物中植入所述过滤器和在所述过滤器上的所述一个或多个靶细胞，其中，在所植入的过滤器上或中的一个或多个细胞中的一些或全部在所述具有免疫缺陷的动物中增殖。

2.根据权利要求1所述的方法，其中，在样品通过所述过滤装置的过程中，基本上所有的非靶细胞穿过所述过滤器。

3.根据权利要求1或权利要求2所述的方法，其中，所述具有免疫缺陷的非人类动物是鼠。

4.根据权利要求3所述的方法，其中，所述鼠对于严重联合免疫缺陷(SCID)自发突变(Prkdc^scid)是纯合的；对于裸自发突变(Foxn1^nu/nu)是纯合的；对于Rag1突变是纯合的；对于Rag2突变是纯合的；或者对于Rag1及Rag2突变是纯合的。

5.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，所述方法包括提供一至四个附加的过滤器，每个所述附加的过滤器包括一个或多个靶细胞，并且在所述具有免疫缺陷的非人类动物中植入所述第一和附加的过滤器。

6.根据权利要求5所述的方法，其中，所述一至四个附加的过滤器是一个附加的过滤器。

7.根据权利要求5所述的方法，其中，所述一至四个附加的过滤器是两个附加的过滤器。

8.根据权利要求5-7中任一项所述的方法，其中，所述第一和附加的过滤器是从单一的过滤装置中获得的。

9.根据权利要求5-7中任一项所述的方法，其中，所述第一和附加的过滤器每个都是从单独的过滤装置中获得的。

10.根据权利要求5-9中任一项所述的方法，所述方法还包括在植入所述过滤器和在所述过滤器上的所述一个或多个靶细胞之前将所述过滤器基本上堆叠在彼此的顶部上以产生多层的培养装置。

11.根据权利要求1-10中任一项所述的方法，所述方法还包括在植入所述过滤器和在所述过滤器上植入所述一个或多个靶细胞之前接触所述过滤器及包含所述靶细胞的任何附加的过滤器的表面，其具有能够从液体转变成凝胶相的组合物，而对靶细胞没有致死或毒性作用。

12.根据权利要求11所述的方法，其中，所述组合物包括一个或多个细胞外基质(ECM)成分。

13.根据权利要求12所述的方法，其中，所述组合物包括重组的基底膜。

14.根据权利要求1-4或11-13中任一项所述的方法，其中，所述过滤器包括固定于其的一个或多个化合物。

15.根据权利要求5-10中任一项所述的方法，其中，附加的过滤器包括固定于其的一个或多个化合物。

16.根据权利要求1-15中任一项所述的方法，其中，一个或多个化合物被施用至具有免疫缺陷的动物。

17.根据权利要求14-16中任一项所述的方法，其中，所述一个或多个化合物选自由生长因子、细胞外基质蛋白、酶、报道分子、脂质体以及核酸构成的组。

18.根据权利要求17所述的方法，其中，所述生长因子是表皮生长因子(EGF)、血小板衍生生长因子(PDGF)、角质细胞生长因子(KGF)、成纤维细胞生长因子(FGF)或转化生长因子(TGF)。

19.根据权利要求17所述的方法，其中，所述细胞外基质蛋白是胶原蛋白、层粘连蛋白、纤连蛋白、或硫酸乙酰肝素。

20.根据权利要求17所述的方法，其中，所述报道分子包括荧光团-淬灭剂双重标记探针，其是用于金属蛋白酶的基片。

21.根据权利要求1-20中任一项所述的方法，所述方法还包括监测在所述具有免疫缺陷的动物中的所述细胞的生长。

22.根据权利要求1-21中任一项所述的方法，其中，所述流体含有细胞的样品包括外周血细胞。