[发明专利]物质的测定方法

说明书

技术领域

本发明涉及使用生物传感器来进行被检体所含的测定对象物质的定量的物质的测定方法。

背景技术

以往，已知有一种如下所述的物质的测定方法：使用生物传感器来计测氧化电流，由此进行测定对象物质的定量，所述生物传感器具有：被供给被检体的腔室、包含作用极和对极的电极系统、以及包含与测定对象物质进行特异性反应的酶的反应层，所述氧化电流是通过将以对极为基准的测定电位施加给作用极来使还原物质氧化而得到的电流，所述还原物质是通过被供给至腔室的被检体所含的测定对象物质和反应层反应而生成的物质。

生物传感器通过层叠在由聚对苯二甲酸乙二醇酯构成的绝缘性的基板设置电极而成的电极层、保护(cover)层、以及被电极层和保护层夹持配置的隔离物(spacer)层而形成。另外，在隔离物层设置有用于形成被供给被检体的腔室的狭缝，通过对电极层隔着隔离物层层叠保护层并粘合，由电极层以及保护层和隔离物层的狭缝的部分形成被供给血液样品等被检体的腔室，在生物传感器的侧面形成有被检体导入口。另外，虽然从被检体导入口向腔室供给被检体，但为了利用毛细现象向腔室供给被检体，在保护层形成有与所形成的腔室的终端部分连通的空气孔。

另外，通过将作用极及对极、与分别和作用极及对极电连接的电极图案设置于电极层，来在电极层形成电极系统。另外，作用极及对极分别以其一部分露出于在生物传感器形成的腔室的方式设置在电极层，在作用极和对极的露出于腔室的部分设置有反应层。因此，若从被检体导入口向腔室供给被检体，则被检体与露出于腔室的各电极以及反应层接触，并且反应层溶解于被检体。

另外，设置在作用极和对极上的反应层中含有被检体所含的例如与葡萄糖进行特异性反应的葡萄糖氧化酶、和作为介体(电子受容体)的铁氰化钾。而且，铁氰化钾溶解于被检体所产生的铁氰化离子被在葡萄糖与葡萄糖氧化酶进行反应而被氧化为葡萄糖酸内酯时释放的电子还原成作为还原体的亚铁氰化离子。因此，若从被检体导入口向形成于生物传感器的腔室供给包含葡萄糖的被检体，则由于铁氰化离子基于葡萄糖被氧化而释放的电子而还原，所以作为铁氰化离子的还原体的亚铁氰化离子生成与包含于被检体并通过酶反应而被氧化的葡萄糖的浓度对应的量。

在这样构成的生物传感器中，通过将酶反应的结果所产生的介体的还原体在作用极上氧化而得到的氧化电流成为依赖于被检体的葡萄糖浓度的大小。因此，通过计测该氧化电流，能够进行被检体所含的葡萄糖的定量。

为了实现上述氧化电流的测定精度的提高，在以去除在露出于生物传感器的腔室的作用极和对极上附着的污垢、灰尘等杂质为目的，向作用极施加以对极为基准的测定电位之前，以对极为基准向作用极施加调整电位。例如，在专利文献1所记载的物质的测定方法中，如图12的用于对以往的物质的测定方法的一例进行说明的图所示，在向作用极施加以对极为基准的测定电位E2之前，向作用极施加电位比测定电位E2低的调整电位E1。

因此，由于通过在计测上述氧化电流之前先向作用极施加调整电位E1，能够利用电化学反应来除去附着在作用极和对极的杂质，所以可降低通过向作用极施加以对极为基准的测定电位而得到的响应电流所含的电流分量中、由附着在作用极和对极的杂质进行电化学反应产生的电流分量，由于能够增大响应电流所含的上述氧化电流的比例，所以可期望提高作为计测对象的氧化电流的计测精度。

专利文献1:日本特表2009-533690号公报(段落0008～0012、说明书等)

在上述的以往的物质的计测方法中，由于向作用极施加电位比测定电位低的调整电位，所以无法从作用极和对极除去在向作用极施加了电位比调整电位高的测定电位时进行电化学反应的杂质，因此要求改善技术。

发明内容

本发明是鉴于上述技术问题而进行的，其目的在于，供给一种降低由向作用极施加以对极为基准的测定电位而得到的响应电流所含的电流分量中、与通过被检体中的测定对象物质与酶反应而生成的还原物质被氧化所得到的氧化电流不同的电流分量造成的影响，由此可提高对被检体所含的测定对象物质进行定量时的测定精度的技术。