[发明专利]生物液体中的稀有细胞的检测、分离和分析

权利要求书

1.从哺乳动物的生物液体中分离或富集稀有细胞的方法，所述方法包括：

(i)提供固定在基质上的抗体，所述基质例如大平板、陪替氏培养皿、孔、微孔、载玻片、条、杆、珠或微阵列板或微阵列载玻片，其中所述抗体结合所述稀有细胞的细胞表面抗原；

(ii)使固定化的抗体与生物液体样品接触，其中体液包含所述稀有细胞和多种其他细胞；

(iii)将固定化的抗体与体液样品在适合于所述抗体与所述稀有细胞的细胞表面抗原结合的条件下温育，以形成抗体-稀有细胞复合体；以及

(iv)洗涤所述抗体-稀有细胞复合体，以除去未结合的细胞并提供固定化的抗体-稀有细胞复合体。

2.如权利要求1所述的方法，其中所述抗体对胎儿细胞表面抗原是特异性的。

3.如权利要求2所述的方法，其中所述胎儿细胞表面抗原是胎儿有核红细胞抗原。

4.如权利要求3所述的方法，其中所述抗体是抗体4B9。

5.如权利要求1所述的方法，其中所述哺乳动物是人。

6.如权利要求1所述的方法，其中所述生物液体是血液、血浆、羊水、尿液或来自绒毛膜绒毛取样(CVS)活组织检查的细胞悬浮液。

7.对生物液体中的稀有细胞进行检测的方法，所述方法包括：

(i)提供固定在基质上的第一抗体，其中所述第一抗体结合所述稀有细胞的第一细胞表面抗原；

(ii)使固定化的第一抗体与生物液体样品接触，其中体液包含所述稀有细胞和多种其他细胞；

(iii)将固定化的第一抗体与体液样品在适合于所述第一抗体与所述稀有细胞的第一细胞表面抗原结合的条件下温育，以形成第一抗体-稀有细胞复合体；

(iv)洗涤所述第一抗体-稀有细胞复合体，以除去未结合的细胞并提供分离的第一抗体-稀有细胞复合体；

(v)将所述第一抗体-稀有细胞复合体与结合所述稀有细胞的第二细胞表面抗原的第二抗体在适合于所述第二抗体与所述第二细胞表面抗原结合的条件下温育，以形成第一抗体-稀有细胞-第二抗体复合体；以及

(vi)检测所述第一抗体-稀有细胞-第二抗体复合体中的所述第二抗体，从而检测所述体液样品中所述稀有细胞的存在。

8.如权利要求7所述的方法，其中所述生物液体是血液、血浆、羊水、尿液或来自绒毛膜绒毛取样(CVS)活组织检查的细胞悬浮液。

9.如权利要求7所述的方法，其中所述第一抗体对胎儿细胞表面抗原是特异性的。

10.如权利要求9所述的方法，其中所述第一抗体是抗体4B9。

11.如权利要求9所述的方法，其中所述第二抗体对胎儿细胞表面抗原是特异性的。

12.如权利要求11所述的方法，其中所述第二抗体对胎儿ε-球蛋白、CD36、CD71或CD47是特异性的。

13.如权利要求7所述的方法，其中所述第一抗体对CD36、CD71或CD47是特异性的。

14.如权利要求7所述的方法，其中所述第二抗体是抗体4B9。

15.如权利要求7所述的方法，其中通过将所述第一抗体-稀有细胞-第二抗体复合体与特异性结合所述第二抗体的带有可检测性标记的第三抗体在适合于抗体结合的条件下温育，以形成第一抗体-稀有细胞-第二抗体-第三抗体复合体；洗涤所述抗体-稀有细胞-第二抗体-第三抗体复合体；检测所述带有可检测标记的第三抗体；从而检测所述样品中的所述稀有细胞。