[发明专利]酰基-酰基载体蛋白(ACYL-ACP)蜡酯合酶在审
申请号: | 201280057444.8 | 申请日: | 2012-03-06 |
公开(公告)号: | CN103975070A | 公开(公告)日: | 2014-08-06 |
发明(设计)人: | 埃里克·霍尔特萨普尔;约翰·H·韦鲁托 | 申请(专利权)人: | 艾克森美孚研究与工程公司 |
主分类号: | C12P7/64 | 分类号: | C12P7/64;C12N1/21 |
代理公司: | 北京律盟知识产权代理有限责任公司 11287 | 代理人: | 齐杨 |
地址: | 美国新*** | 国省代码: | 美国;US |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 酰基 载体 蛋白 acyl acp 蜡酯合酶 | ||
1.一种经遗传改造以供从酰基-酰基载体蛋白ACP产生脂肪酸酯的重组宿主细胞,其中所述重组宿主细胞包含编码酰基-ACP蜡酯合酶的非天然核酸序列,且另外其中所述重组宿主细胞不表达以下酶中的一或多者:
a)外源酰基-ACP硫酯酶;
b)外源酰基-CoA硫酯酶;和
c)外源酰基-CoA合成酶。
2.根据权利要求1所述的重组宿主细胞,其中所述重组宿主细胞不包括编码酰基-ACP硫酯酶、酰基-CoA硫酯酶或酰基-CoA合成酶中的任一者的外源核酸序列。
3.根据权利要求1所述的重组宿主细胞,其中所述重组宿主细胞不内源性产生酰基-CoA。
4.根据权利要求1所述的重组宿主细胞,其中所述重组宿主细胞经改造以减弱或消除酰基-CoA产生。
5.根据权利要求1所述的重组宿主细胞,其中所述蜡酯合酶与选自由SEQ ID NO:19、SEQ ID NO:21、SEQ ID NO:23、SEQ ID NO:25、SEQ ID NO:27、SEQ ID NO:29、SEQ ID NO:31、SEQ ID NO:33、SEQ ID NO:35、SEQ ID NO:37、SEQ ID NO:39、SEQ ID NO:41或SEQ ID NO:43组成的群组的多肽或与所述多肽中任一者的功能性片段具有至少50%序列一致性。
6.根据权利要求1所述的重组宿主细胞,其中所述蜡酯合酶包含与SEQ ID NO:19或SEQ ID NO:21的所述多肽或与所述多肽的功能性片段具有至少85%序列一致性的多肽。
7.根据权利要求1所述的重组宿主细胞,其中所述重组宿主细胞进一步包含编码形成醇的酰基-ACP还原酶的非天然核酸序列。
8.根据权利要求1所述的重组宿主细胞,其中所述重组宿主细胞不包括编码酰基-ACP硫酯酶、酰基-CoA硫酯酶或酰基-CoA合成酶中的任一者的外源核酸序列。
9.根据权利要求7所述的重组宿主细胞,其中所述形成醇的酰基-ACP还原酶与选自由SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:8和SEQ ID NO:10组成的群组的多肽或与所述多肽中任一者的功能性片段具有至少50%序列一致性。
10.根据权利要求9所述的重组宿主细胞,其中所述形成醇的酰基-ACP还原酶包含与SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:4或与所述多肽的功能性片段具有至少85%序列一致性的多肽。
11.根据权利要求1所述的重组宿主细胞,其中将编码所述蜡酯合酶的所述核酸序列、编码形成醇的酰基-ACP还原酶的核酸序列或编码所述蜡酯合酶的所述核酸序列和编码所述形成醇的酰基-ACP还原酶的所述核酸序列二者整合到所述重组宿主细胞的染色体中。
12.根据权利要求11所述的重组宿主细胞,其中将编码所述蜡酯合酶的所述核酸序列和编码所述形成醇的酰基-ACP还原酶的所述核酸序列可操作连接到相同启动子。
13.根据权利要求1所述的重组宿主细胞,其中所述宿主细胞是光合微生物。
14.根据权利要求13所述的重组宿主细胞,其中所述光合微生物是蓝细菌。
15.根据权利要求14所述的重组宿主细胞,其中所述光合微生物是阿格门氏藻、鱼腥藻属、项圈藻属、倒囊藻属、丝囊藻属、节螺藻属、星球藻属、博氏藻属、眉藻属、管孢藻属、拟绿胶蓝细菌属、拟色球藻属、色球藻属、发毛针藻属、蓝细菌、双色藻属、蓝囊胞菌属、蓝螺菌属、蓝杆藻属、柱胞藻属、筒孢藻属、蓝纤维藻属、小皮果蓝细菌属、侧生藻属、费氏藻属、盖特勒氏蓝细菌属、吉特勒氏线状蓝细菌属、胶菌藻、粘球藻属、粘杆藻属、盐螺旋藻属、英加藻属、瘦鞘丝藻属、湖丝藻属、鞘丝藻属、微鞘藻属、微囊藻属、粘囊藻属、节球藻属、念珠藻属、拟念珠藻属、颤藻属、席藻属、浮丝藻属、宽球藻属、原绿球藻属、原绿菌属、原绿发菌属、假鱼腥藻属、胶须藻属、裂须藻属、双歧藻属、螺旋藻属、斯塔尼尔蓝菌属、斯塔尔氏蓝菌属、真枝藻属、束藻属、聚球藻属、集胞藻属、嗜热聚球藻、单岐藻属、束毛藻属、常丝藻或异球藻属。
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