[发明专利]与卵巢癌相关的方法和材料

说明书

相关申请的交叉参考

本申请要求2011年10月14日提交的美国临时申请61/547,109和2012年7月25日提交的美国临时申请61/675,449的利益，所述美国临时申请的公开内容通过引用明确地并入本文，用于所有目的。

关于联邦政府资助的研究的声明

本发明是在国立卫生研究院(NIH/EDRN)授予的基金号U01CA152758下由美国政府支持进行的。美国政府具有本发明的某些权利。

关于序列表的声明

本申请通过USPTO EFS-WEB服务器电子提交，如MPEP§1730II.B.2(a)(A)中所授权和规定的，并且该电子提交包括电子提交的序列(SEQ ID)表。该序列表的完整内容通过引并入本文用于所有目的。序列表在电子地提交的.txt文件中标识为：2012年10月11日创建的604_53324_SEQ_LIST_2012-030.txt，其大小为3,287字节。

发明领域

本申请涉及医学，特别地肿瘤学的领域。本发明还涉及分子生物学，特别地microRNA的领域。

发明背景

卵巢癌是发达国家中妇科学癌症相关死亡的首要原因。虽然通过改进的减积手术(debulking surgery)和铂-紫杉烷方案的引入在其治疗上已取得进步，但在晚期疾病中5年总体存活率仅为29％，这主要归因于晚期的诊断和对铂类化学疗法的固有抗性和获得性抗性。因此，鉴定卵巢癌化疗抗性(chemoresistance)的分子标志物是至关重要的。分子水平上的发现的成功翻译将产生个体化治疗方案，改善化学治疗响应率和避免不必要的治疗。

特别地，上皮卵巢癌是最常见的妇科学恶性肿瘤；是高度侵袭性的并且每年引起几乎125,000例死亡。尽管在检测和细胞毒疗法上取得进展，但极低百分数的晚期疾病患者在初次诊断后存活5年。该疾病的高死亡率主要归因于对可获得的疗法的抗性。

MicroRNA(miR)是一类小的非编码RNA，其调节基因表达，引起翻译抑制、mRNA切割或去稳定作用。它们参与许多生理细胞过程。最重要地，不断积累的证据表明，许多miR在人癌症中异常表达，并且它们的表达特征谱(profile)可对一些癌症的分期、亚型和预后进行分类。

附图概述

本专利或申请文件包含至少一个以彩色绘制的附图。具有彩色附图的本专利或专利申请公开案的拷贝可应要求和支付必要的费用后由专利局提供。

图1A-1D。

图1A.使用TLDA卡对训练组的分析。显示显著的miR。

图1B.鉴定的miR的图心分析。下调的miR以绿色表示，上调的miR以红色表示。

图1C.以两个种类：非响应者(稳定的疾病和进行性疾病)和响应者(完全响应者和部分响应者)重新定义的训练组中的显著miR。

图1D.训练组中的显著的miR。

图2A-2D。

图2A.用MDAH-2274对照细胞在右肋腹注射和用过表达miR-484的MDAH-2274在左肋腹注射的小鼠的肿瘤体积。显示了CBDCA+Tax治疗开始当天(左图)肿瘤的尺寸和21天的治疗后它们的增大(右图)。

图2B.用SKOV-3对照细胞在右肋腹注射和用过表达miR-484的SKOV-3在左肋腹注射的裸小鼠的体内成像。在即将开始治疗时(左图框)和在21天的CBDCA+Tax治疗后拍摄图像。

图2C.B中描述的实验在治疗的第0天(左图)和在7、14和21天的治疗后(右图)的体内EGFP荧光的定量。

图2D.在CBDCA+Tax治疗存在的情况下表达对照(scr)或miR-484的慢病毒的瘤内注射的作用。在每一个图中报告了显著的差异，如通过非参数t-检验评价的。当<0.05时，差异被认为是显著的。

图3A-3C。

图3A.左图框：VEGFB的3'UTR中潜在miRs-484结合位点的比对。中间图框：在293细胞中转染miR-484后VEGFB的Western印迹分析。右图框：微管蛋白与VEGFB的表达之间的光密度比值(densitometric ratio)。

图3B.左图框：VEGFR2的3'UTR中潜在miRs-484结合位点的比对。中间图框：在HUVEC细胞中转染miR-484后VEGFR2的Western印迹分析。右图框：微管蛋白与VEGFR2的表达之间的光密度比值。