[发明专利]工程改造的微生物及用于微生物油生产的方法

权利要求书

1.分离的产油细胞，其包含增加DGA1基因产物的表达的遗传修饰。

2.权利要求1的分离的产油细胞，其进一步包含增加ACC1基因产物的表达的遗传修饰。

3.权利要求1或权利要求2的分离的产油细胞，其进一步包含增加SCD基因产物的表达的遗传修饰。

4.权利要求1-3的任何一项的分离的产油细胞，其进一步包含增加ACL基因产物的表达的遗传修饰。

5.权利要求1-4的任何一项的分离的产油细胞，其中的遗传修饰包含增加基因产物表达的核酸构建体，所述核酸构建体包含

(a)包含在合适的同源或异源启动子的控制下的、编码基因产物的核酸序列的表达盒，及/或

(b)当插入细胞基因组时，调制基因产物的表达水平的核酸序列。

6.权利要求5的分离的产油细胞，其中启动子为诱导型或组成型启动子。

7.权利要求5或权利要求6的分离的产油细胞，其中启动子为TEF启动子。

8.权利要求5-7的任何一项的分离的产油细胞，其中表达构建体进一步包含内含子。

9.权利要求8的分离的产油细胞，其中内含子位于转录起始位点的下游。

10.权利要求8或权利要求9的分离的产油细胞，其中内含子是在编码基因产物的核酸序列之内。

11.权利要求1-10的任何一项的分离的产油细胞，其中核酸构建体抑制或破坏对编码基因产物的原生基因的天然调控，导致原生基因的过表达。

12.权利要求11的分离的产油细胞，其中对原生基因的天然调控的抑制或破坏是通过对调控所述基因表达的调控区域或调控区域的部分进行删除、破坏、突变和/或置换而介导的。

13.权利要求1-12的任何一项的分离的产油细胞，其中基因产物是转录物。

14.权利要求1-13的任何一项的分离的产油细胞，其中基因产物为蛋白质。

15.权利要求5-14的任何一项的分离的产油细胞，其中核酸构建体插入细胞的基因组内。

16.权利要求1-15的任何一项的分离的产油细胞，其中基因产物的表达增加赋予细胞将碳源向脂肪酸、脂肪酸衍生物和/或甘油三酯(TAG)转化的有益表型。

17.权利要求16的分离的产油细胞，其中有益表型包括修饰的脂肪酸谱、修饰的TAG谱、增加的脂肪酸和/或甘油三酯合成速率、增加的转化产率、增加的细胞中甘油三酯积累及/或增加的细胞脂质体中甘油三酯的积累。

18.权利要求16或17的分离的产油细胞，其中细胞的脂肪酸或TAG的合成速率比相同细胞类型的未修饰细胞增加至少2倍。

19.权利要求18的分离的产油细胞，其中细胞的脂肪酸或TAG的合成速率比相同类型细胞类型的未修饰细胞增加至少5倍。

20.权利要求18的分离的产油细胞，其中细胞的脂肪酸或TAG的合成速率比相同类型细胞类型的未修饰细胞增加至少10倍。

21.权利要求16-20的任何一项的分离的产油细胞，其中细胞将碳源转化为脂肪酸或TAG的转化率在大约0.025g/g-大约0.32g/g(产生的TAG g/消耗的葡萄糖g)的范围内。

22.权利要求21的分离的产油细胞，其中细胞将碳源转化为脂肪酸或TAG的转化率为至少大约0.11g/g。

23.权利要求22的分离的产油细胞，其中细胞将碳源转化为脂肪酸或TAG的转化率为至少大约0.195g/g。

24.权利要求23的分离的产油细胞，其中细胞将碳源转化为脂肪酸或TAG的转化率为至少大约0.24g/g。

25.权利要求24的分离的产油细胞，其中细胞将碳源转化为脂肪酸或TAG的转化率为至少大约0.27g/g。

26.权利要求1-25的任何一项的分离的产油细胞，其中细胞包含脂质小体或液泡。

27.权利要求1-26的任何一项的分离的产油细胞，其中细胞为细菌细胞、藻类细胞、真菌细胞或酵母细胞。