[发明专利]检测莱姆病抗体的肽和方法

说明书

相关申请的交叉参考

本申请要求2011年11月4日申请的美国临时申请No.61/556,061的优先权，该申请全文并入本文作参考。

电子递交文本文件的描述

电子递交的文本文件内容全文并入本文作参考：序列表的计算机可读形式(文件名：ABAX_039_01WO_SeqList_ST25.txt,记录日期：2012年11月2日,文件大小45千字节)。

发明背景

莱姆病是一种导致人体虚弱的病症，已经成为重要的公共卫生健康问题。该疾病是由于感染病原性疏螺旋体属(Borrelia)细菌(螺旋菌)所致，并且通过疏螺旋体属各物种感染的硬蜱虫(Ixodes ticks)叮咬传播。莱姆病的精确及早期检测对于有效治疗是关键因素。足以诊断莱姆病的唯一临床症状是存在游走性红斑，具有牛眼状(bulls-eye)特殊外观的皮疹。然而，游走性红斑仅存在于感染早期，甚至不是在所有感染的个体中均出现。在不存在游走性红斑的情况中，与莱姆病相关的其它临床症状如Bell’s麻痹单独或者组合均不能足够特异性地确定临床诊断。

在不存在游走性红斑的情况中，诊断莱姆病的基础是应答病原性疏螺旋体物种如伯氏疏螺旋体(Borrelia burgdorferi)、阿氏疏螺旋体(Borrelia afzelli)或者伽氏疏螺旋体(Borrelia garinii)的抗体。在北美洲，疾病控制中心(CDC)推荐一种两级(two-tier)方法对莱姆病进行血清学诊断，包括灵敏的第一级测定如ELISA，随后如果第一级测定是阳性或者意义不明的则进行western印迹。第一级测定传统上使用全细胞伯氏疏螺旋体属抗原或者重组疏螺旋体属蛋白质。但是这种测定可能难以解释，并且由于产生自接种而非感染的疏螺旋体属抗体而复杂化。此外，在一些疏螺旋体属测定中使用的全细胞超声降解物与密螺旋体属(Treponema)抗体反应。

最近，基于疏螺旋体属的可变表面抗原(VlsE)的保守IR6结构域的C6肽测定已经被广泛接受作为第一级测定，其对于传播性和末期莱姆病具有高度灵敏性。所述C6肽测定使用伯氏疏螺旋体VlsE蛋白的单独25个氨基酸的序列作为检测抗原。尽管已经建议C6肽测定可适用于单一级别方法诊断莱姆病，但是显然C6测定对于这种目的不够灵敏，因为其不能检测某些感染性疏螺旋体属菌株。

因此，本领域仍需要另外的检测疏螺旋体属抗原的测定及莱姆病的血清学诊断方法。

发明概述

本发明部分基于发现疏螺旋体属VlsE蛋白质的IR6结构域中某些序列变体可以提供针对广泛疏螺旋体属物种的抗体应答的强力(robust)检测。因此，本发明提供了可用于检测结合疏螺旋体属抗原的抗体及诊断莱姆病的组合物、装置、方法和试剂盒。

一方面，本发明提供了能结合识别疏螺旋体属抗原的抗体的肽。在某些实施方案中，所述肽包含VlsE IR6结构域及来自至少一种(如两种、三种等)其它疏螺旋体属抗原的序列。在某些实施方案中，所述至少一种其它疏螺旋体属抗原是表面抗原(例如OspC、p41或者其组合)。

在某些实施方案中，本发明的肽包含序列SEQ ID NO:1,L-K-K-D-D-N-I-A-A-A-X₁₁-V-L-R-G-X₁₆-X₁₇-K-D-G-X₂₁-F-A-X₂₄-X₂₅(SEQ ID NO:1)，其中X₁₁是选自V和L的氨基酸，X₁₆是选自L和I的氨基酸，X₁₇是选自A和V的氨基酸，X₂₁是选自R、D和N的氨基酸，X₂₄是选自I、W和Y的氨基酸，X₂₅是选自K和R的氨基酸。