[发明专利]使用具有对水解酶抗性的衣壳的VLP的方法

权利要求书

1.一种病毒样颗粒(VLP)，所述病毒样颗粒包含封入至少一种异源货物分子和包装序列的衣壳。

2.根据权利要求1所述的VLP，所述VLP还包含由所述衣壳封入的至少一种核酶。

3.根据权利要求2所述的VLP，其中所述异源货物分子包含寡核苷酸。

4.根据权利要求3所述的VLP，其中所述异源货物分子包含寡核糖核苷酸。

5.根据权利要求4所述的VLP，其中所述核酶的侧翼为所述包装序列和所述寡核糖核苷酸，以形成核酸构建体。

6.根据权利要求5所述的VLP，所述VLP包含多个所述核酸构建体。

7.根据权利要求4所述的VLP，其中所述寡核糖核苷酸是选自siRNA、shRNA、sshRNA、lshRNA和miRNA的短RNA。

8.根据权利要求7所述的VLP，所述VLP包含至少两种核酶，其中每种核酶选择为切割所述短RNA的一个末端。

9.根据权利要求4所述的VLP，所述VLP还包含由至少1-100个核苷酸组成的接头，所述接头包含至少40％的A或至少40％的U，其中所述接头连接所述寡核糖核苷酸和所述包装序列、或所述寡核糖核苷酸和所述核酶。

10.根据权利要求2所述的VLP，其中所述核酶选自锤头状核酶和丁型肝炎病毒核酶。

11.根据权利要求2所述的VLP，其中所述核酶是具有与所述寡核糖核苷酸的至少6个连续核苷酸互补的连续核苷酸组的锤头状核酶变体。

12.根据权利要求2所述的VLP，其中所述核酶是能够切割其与所述寡核糖核苷酸的连接的突变型丁型肝炎病毒核酶，其速率为野生型丁型肝炎病毒核酶速率的至多约50％。

13.根据权利要求2所述的VLP，其中所述核酶是具有选自SEQ ID No:10-18的核酸序列的突变型HDV核酶。

14.根据权利要求1所述的VLP，其中所述衣壳包含野生型病毒衣壳，其对由肽键水解酶类别EC 3.4催化的水解是抗性的。

15.根据权利要求1所述的VLP，其中所述衣壳包含这样的衣壳蛋白质，其与野生型肠杆菌噬菌体MS2衣壳(SEQ ID NO:3)的氨基酸序列具有至少40％序列同一性，并且对由肽键水解酶类别EC 3.4催化的水解是抗性的。

16.根据权利要求1所述的VLP，其中所述衣壳包含这样的衣壳蛋白质，其与野生型肠杆菌噬菌体MS2衣壳(SEQ ID NO:3)的氨基酸序列具有至少41％序列同一性，并且对由肽键水解酶类别EC 3.4催化的水解是抗性的。

17.根据权利要求1所述的VLP，其中所述衣壳包含这样的衣壳蛋白质，其与野生型肠杆菌噬菌体MS2衣壳(SEQ ID NO:3)的氨基酸序列具有至少45％序列同一性，并且对由肽键水解酶类别EC 3.4催化的水解是抗性的。

18.根据权利要求1所述的VLP，其中所述衣壳包含这样的衣壳蛋白质，其与野生型肠杆菌噬菌体MS2衣壳(SEQ ID NO:3)的氨基酸序列具有至少52％序列同一性，并且对由肽键水解酶类别EC 3.4催化的水解是抗性的。

19.根据权利要求1所述的VLP，其中所述衣壳包含这样的衣壳蛋白质，其与野生型肠杆菌噬菌体MS2衣壳(SEQ ID NO:3)的氨基酸序列具有至少53％序列同一性，并且对由肽键水解酶类别EC 3.4催化的水解是抗性的。

20.根据权利要求1所述的VLP，其中所述衣壳包含这样的衣壳蛋白质，其与野生型肠杆菌噬菌体MS2衣壳(SEQ ID NO:3)的氨基酸序列具有至少56％序列同一性，并且对由肽键水解酶类别EC 3.4催化的水解是抗性的。

21.根据权利要求1所述的VLP，其中所述衣壳包含这样的衣壳蛋白质，其与野生型肠杆菌噬菌体MS2衣壳(SEQ ID NO:3)的氨基酸序列具有至少59％序列同一性，并且对由肽键水解酶类别EC 3.4催化的水解是抗性的。