[发明专利]体液的细胞分析在审
申请号: | 201280064502.X | 申请日: | 2012-12-19 |
公开(公告)号: | CN104024437A | 公开(公告)日: | 2014-09-03 |
发明(设计)人: | 吴炯;艾米丽·H.·林;杨金平 | 申请(专利权)人: | 雅培制药有限公司 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;G01N33/48;C12M3/00;G01N1/10 |
代理公司: | 北京弘权知识产权代理事务所(普通合伙) 11363 | 代理人: | 荣文英;郭放 |
地址: | 美国伊*** | 国省代码: | 美国;US |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 体液 细胞 分析 | ||
1.一种用于分析含有细胞的体液的方法,所述方法包括:
用荧光染料将所述体液染色,其中所述荧光染料渗透细胞膜并且结合至核酸以在所述细胞内形成染料复合物;
用来自能量源的能量照射所述染色体液;并且
测量所述染色体液中的由所述染料复合物发出的荧光信号。
2.如前述权利要求中任一项所述的方法,其中所述体液包含少于约20个细胞/微升。
3.如前述权利要求中任一项所述的方法,其中所述体液包含大于约20个细胞/微升。
4.如前述权利要求中任一项所述的方法,其中所述核酸是DNA或RNA。
5.如前述权利要求中任一项所述的方法,其中所述能量源产生具有所述可见光谱中的波长的单色光,并且其中所述单色光的所述波长与所述荧光信号的所述波长是不同的。
6.如前述权利要求中任一项所述的方法,其中与所述染料复合物相比,未结合荧光染料在用来自能量源的能量照射时发出较少荧光。
7.如前述权利要求中任一项所述的方法,在未结合至所述核酸时,未结合荧光染料在用来自所述能量源的能量照射时不发荧光,以使得没有所述染料复合物的细胞不发出荧光信号。
8.如前述权利要求中任一项所述的方法,其进一步包括基于所述荧光染料的存在或不存在,来区分具有细胞核的细胞与没有细胞核的细胞。
9.如前述权利要求中任一项所述的方法,其中所述测量涉及点计并且区分红细胞(RBC)与白细胞(WBC)。
10.如前述权利要求中任一项所述的方法,其中所述方法在所述测量之前不涉及使RBC溶解。
11.如前述权利要求中任一项所述的方法,其中所述体液包含完整WBC和RBC。
12.如前述权利要求中任一项所述的方法,其中所述测量使用自动血液分析器、流式细胞仪,或用于体液样品的另一种诊断分析器来执行。
13.如前述权利要求中任一项所述的方法,其中所述测量包括使所述体液流经血细胞计数器中的流槽。
14.如前述权利要求中任一项所述的方法,其中所述荧光染料提供于组合物中,所述组合物进一步包括水。
15.一种用于分析流体的方法,其中所述流体含有少于约40个细胞/微升,所述方法包括:
使所述流体与荧光染料接触,其中所述荧光染料渗透细胞膜并且结合至核酸以在所述细胞内形成染料复合物;
用来自能量源的能量照射所述流体;并且
测量所述流体中的由所述染料复合物发出的荧光信号。
16.如权利要求15所述的方法,其中所述流体含有少于约20个细胞/微升。
17.如权利要求15至16中任一项所述的方法,其中所述流体含有少于约5个细胞/微升。
18.如权利要求15至17中任一项所述的方法,其中所述流体是体液。
19.如权利要求15至18中任一项所述的方法,其中所述流体是生物流体。
20.一种用于区分细胞的方法,所述方法包括:
使所述细胞与包含荧光染料的溶液接触,其中所述荧光染料是水溶性的、渗透细胞膜,并且结合至核酸;
用来自激发光源的激发光照射所述细胞;
测量来自所述细胞的光发射;
基于所述测量的光发射来区分含有核酸的所述细胞与没有核酸的所述细胞;并且
基于使用一个或多个光散射检测器从所述样品获得的多个光学数据,将所述细胞分类为白细胞(WBC)或红细胞(RBC)。
21.一种用于分析体液的组合物,所述组合物包含水和荧光染料,其中所述荧光染料是水溶性的、渗透细胞膜,并且结合至核酸。
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