[发明专利]细胞组分的同时纯化在审
申请号: | 201280065453.1 | 申请日: | 2012-11-05 |
公开(公告)号: | CN104023551A | 公开(公告)日: | 2014-09-03 |
发明(设计)人: | A·保勒斯;C·迪吉斯;R·保格弗;S·班德卡维;A·哈恩-温德加森;A·珀什;E·布罗德;U·司旺 | 申请(专利权)人: | 生物辐射实验室股份有限公司;泰克尼翁研究发展基金有限公司 |
主分类号: | A23J1/00 | 分类号: | A23J1/00;C07K1/00;C07K14/00;C07K16/00;C07K17/00 |
代理公司: | 上海专利商标事务所有限公司 31100 | 代理人: | 沈端 |
地址: | 美国加利*** | 国省代码: | 美国;US |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 细胞 组分 同时 纯化 | ||
1.一种从包含一个或多个细胞的生物样品纯化至少一种细胞组分的方法,所述方法包括,
向腔体中提供样品,所述样品包含来自所述一个或多个细胞的细胞裂解物;以及
使用一个或多个质子注射器和/或氢氧根注射器在所述腔体中生成pH梯度或pH梯级,从而来自所述细胞的至少两种组分基于所述组分的等电点(pI)定位在所述腔体中的不同位置,由此从不同细胞组分纯化出至少一种细胞组分。
2.权利要求1所述的方法,其特征在于,所述方法还包括检测所述至少两种组分中的至少一种的存在或量。
3.权利要求1所述的方法,其特征在于,所述方法还包括收集所述至少两种不同组分中的至少一种,由此从同一生物样品纯化至少一种组分。
4.权利要求1所述的方法,其特征在于,所述方法还从同一生物样品分开收集两种不同细胞组分,由此从同一生物样品纯化所述两种组分。
5.权利要求3或4所述的方法,其特征在于,使所述组分沿腔体内部的一条路径移动,并且由所述腔体内的孔口分开收集所述组分中的至少一些。
6.权利要求3或4所述的方法,其特征在于,使所述组分沿腔体内部的一条路径向下移动,并且通过腔体内与所述组分的路径垂直的孔口分开收集所述组分。
7.权利要求6所述的方法,其特征在于,所述孔口定位于所述腔体内对应于所述组分的pI。
8.权利要求5所述的方法,其特征在于,通过电泳使所述组分移动。
9.权利要求5所述的方法,其特征在于,通过泵送腔体内的液体来使所述组分移动。
10.权利要求1所述的方法,其特征在于,所述至少两种组分通过电泳定位。
11.权利要求1所述的方法,其特征在于,使一个或多个细胞裂解并随后提供至所述腔体内以生成细胞裂解物。
12.权利要求1所述的方法,其特征在于,使一个或多个细胞在所述腔体内裂解。
13.权利要求12所述的方法,其特征在于,所述细胞裂解的方式是通过生成足够高或足够低的pH以使所述一个或多个细胞裂解。
14.权利要求1所述的方法,其特征在于,所述至少两种组分选自细胞核、DNA、RNA、肽和蛋白质。
15.权利要求1所述的方法,其特征在于,所述不同组分是不同的亚细胞隔室和/或细胞器。
16.权利要求1所述的方法,其特征在于,所述裂解物来自单个细胞。
17.权利要求1所述的方法,其特征在于,使对目标细胞组分具有亲和性的试剂连接至腔体中的某一位置并使所述细胞裂解物的组分移向该试剂或经过该试剂,由此使所述目标细胞组分与所述试剂结合。
18.权利要求17所述的方法,其特征在于,所述目标细胞组分是RNA,并且所述试剂包含寡核苷酸。
19.权利要求18所述的方法,其特征在于,所述寡核苷酸包含足以结合多聚腺苷酸化RNA的多聚T序列。
20.一种从生物样品捕获细胞、细胞组分或病毒的装置或系统,所述装置包含,
腔体,所述腔体用于沿轴线容纳包含生物样品的溶液,其中所述腔体包含位于所述腔体表面的一个或多个狭缝或其他开口,所述狭缝或其他开口与一个或多个质子注射器或氢氧根注射器连通,并且其中所述腔体包含连接至所述腔体内某一位置的试剂,其中所述试剂对目标细胞组分、细胞或病毒具有亲和性;
电源,所述电源用于在所述腔体内于所述注射器中并可任选沿所述轴线施加电场;
一个或多个质子注射器或氢氧根注射器,所述注射器用于通过注射离子流沿所述腔体内的所述轴线建立pH梯度,其能够在一个pH梯度中形成一个或多个pH梯级;
控制器,所述控制器控制所述一个或多个离子源以调节所述pH梯度,从而诱导带电组分、细胞或病毒在所述腔体内沿轴线定位。
21.权利要求20所述的装置或系统,其特征在于,所述试剂包含寡核苷酸。
22.权利要求21所述的装置或系统,其特征在于,所述寡核苷酸包含足以结合多聚腺苷酸化RNA的多聚T序列。
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