[发明专利]乙酰辅酶A衍生的类异戊二烯的生产

权利要求书

1.能够生成类异戊二烯的经遗传修饰的宿主细胞，该细胞包含：

(a)编码甲羟戊酸(MEV)途径中一种或多种用于生成异戊烯焦磷酸的酶的一种或多种异源核酸；和

(b)编码酰化乙酰醛(acetylaldehyde)脱氢酶(ADA)的异源核酸。

2.权利要求1的经遗传修饰的宿主细胞，其中所述MEV途径中的一种或多种酶包括将乙酰-CoA与丙二酰-CoA缩合以形成乙酰乙酰-CoA的酶。

3.权利要求1或2的经遗传修饰的宿主细胞，其中所述MEV途径中的一种或多种酶包括乙酰-CoA:丙二酰-CoA酰基转移酶。

4.权利要求1-3中任一项的经遗传修饰的宿主细胞，其中所述MEV途径中的一种或多种酶包括利用NADH将3-羟基-3-甲基戊二酰基-CoA(HMG-CoA)转化为甲羟戊酸的酶。

5.权利要求1-4中任一项的经遗传修饰的宿主细胞，其中所述MEV途径中的一种或多种酶包括利用NADH的HMG-CoA还原酶。

6.权利要求1-5中任一项的经遗传修饰的宿主细胞，其还包含编码磷酸转酮酶(PK)的异源核酸。

7.权利要求1-6中任一项的经遗传修饰的宿主细胞，其还包含编码磷酸转乙酰酶(PTA)的异源核酸。

8.权利要求1-7中任一项的经遗传修饰的宿主细胞，其还包含天然丙酮酸脱氢酶(PDH)旁路中一种或多种酶的功能性破坏。

9.权利要求8的经遗传修饰的宿主细胞，其中所述PDH旁路中的一种或多种酶选自：乙酰-CoA合酶1(ACS1)，乙酰-CoA合酶2(ACS2)，和醛脱氢酶6(ALD6)。

10.权利要求9的经遗传修饰的宿主细胞，其中ACS1是功能性破坏的。

11.权利要求9的经遗传修饰的宿主细胞，其中ACS2是功能性破坏的。

12.权利要求9的经遗传修饰的宿主细胞，其中ALD6是功能性破坏的。

13.权利要求9的经遗传修饰的宿主细胞，其中ACS1和ACS2是功能性破坏的。

14.权利要求9的经遗传修饰的宿主细胞，其中ACS1，ACS2和ALD6是功能性破坏的。

15.权利要求1-14中任一项的经遗传修饰的宿主细胞，其还包含一种或多种具有醇脱氢酶(ADH)活性的酶的功能性破坏。

16.权利要求15的经遗传修饰的宿主细胞，其中所述一种或多种具有ADH活性的酶选自：醇脱氢酶1(ADH1)，醇脱氢酶3(ADH3)，醇脱氢酶4(ADH4)，和醇脱氢酶5(ADH5)。

17.权利要求1-16中任一项的经遗传修饰的宿主细胞，其中所述ADA的氨基酸序列与SEQ ID NO:2至少80％同一。

18.权利要求3的经遗传修饰的宿主细胞，其中所述乙酰-CoA:丙二酰-CoA酰基转移酶的氨基酸序列与SEQ ID NO:16至少80％同一。

19.权利要求5的经遗传修饰的宿主细胞，其中所述利用NADH的HMG-CoA还原酶的氨基酸序列与SEQ ID NO:20至少80％同一。

20.权利要求6的经遗传修饰的宿主细胞，其中所述磷酸转酮酶(PK)的氨基酸序列与SEQ ID NO:12至少80％同一。

21.权利要求7的经遗传修饰的宿主细胞，其中所述磷酸转乙酰酶(PTA)的氨基酸序列与SEQ ID NO:14至少80％同一。

22.权利要求1，4-17和19-21中任一项的经遗传修饰的宿主细胞，其中所述MEV途径中的一种或多种酶包括将两分子乙酰-CoA缩合以形成乙酰乙酰-CoA的酶。

23.权利要求1-22中任一项的经遗传修饰的宿主细胞，其中所述MEV途径中的一种或多种酶包括将乙酰乙酰-CoA与乙酰-CoA缩合以形成HMG-CoA的酶。

24.权利要求1-3，6-18和20-22中任一项的经遗传修饰的宿主细胞，其中所述MEV途径中的一种或多种酶包括将HMG-CoA转化成甲羟戊酸的酶。