[发明专利]环孢菌素A形式2及其制备方法

说明书

相关申请的交叉引用

本申请要求2011年11月15日提交的美国临时专利申请号61/559,830的优先权，所述申请的全部内容特此以引用的方式并入。

背景

本文公开了一种用于制备环孢菌素A的新晶体形式的方法。

环孢菌素A

环孢菌素A(CsA)是具有以下化学结构的环肽：

它的化学名称为环[[(E)-(2S,3R,4R)-3-羟基-4-甲基-2-(甲氨基)-6-辛烯酰基]-L-2-氨基丁酰基-N-甲基甘氨酰基-N-甲基-L亮氨酰基-L-缬氨酰基-N-甲基-L-亮氨酰基-L-丙氨酰基-D-丙氨酰基-N-甲基-L-亮氨酰基-N-甲基-L-亮氨酰基-N甲基-L-缬氨酰基]。它还被称为环孢霉素(cyclosporine)、环孢霉素A、环孢菌素和环孢菌素A。它是(Allergan,Inc.,Irvine,California)(一种包含0.05％(w/v)环孢菌素的乳剂)中的活性成分。在美国被批准用于增加患者的泪液产生，所述患者的泪液产生据推测因干燥性角结膜炎相关联的眼部炎症而受到抑制。

已知环孢菌素A以无定形形式、液晶形式、四方晶体形式(形式1)和斜方晶形式(形式3)存在。本发明人此处描述了一种制备新晶体形式即环孢菌素A形式2的方法。

附图简述

图1描绘了新晶体形式(本文标示为形式2)、四方晶形式(本文标示为形式1)和斜方晶形式(本文标示为形式3)的CsA的特征性X射线粉末衍射(XRPD)图案。

图2描绘了CsA晶体形式2的XRPD衍射图。

图3描绘了CsA形式2的水吸附/解吸曲线。

图4描绘了从具有1％PS80的0.04％制剂中回收的CsA形式2的MDSC分析。

图5描绘了用于产生根据本发明的方法产生的CsA形式2的加热和冷却循环。

图6示出了根据本发明的方法，使用无定形环孢菌素A作为起始材料获得的CsA形式2的x射线衍射图案(XRPD)。

图7示出了根据本发明的方法，使用四方晶环孢菌素A作为起始材料获得的CsA形式2的XRPD。

图8示出了根据本发明的方法，使用斜方晶环孢菌素A作为起始材料获得的CsA形式2的XRPD。

图9示出了环孢霉素A形式的模拟XRPD图案。

详述

CsA形式2的XRPD图案显著不同于四方晶形式和斜方晶形式(图1)。当通过具有X射线源的X射线衍射仪(Cu Kα辐射，在30kV/15mA下)进行扫描时，在以下(2θ)处出现CsA形式2的晶体主峰：7.5、8.8、10.2、11.3、12.7、13.8、14.5、15.6和17.5(分别是约11.8、10.0、8.7、7.8、7.0、6.4、6.1、5.6和下的晶格间距d，图2)。这些主峰被定义为相对于斜方晶或四方晶形式，对形式2来说是独特的那些峰；以及强度大于5倍背景的峰。

在一个实施方案中，CsA的新晶体形式(形式2)是环孢菌素A的非化学计量水合物。在另一个实施方案中，晶体形式2以下式来表示：

X H₂O，

其中X为水分子数并且从0变化到3。在一个实施方案中，上式中的X为2。

形式2似乎是CsA在水性悬浮液中动力学上稳定的形式。含形式2的悬浮液在储存时没有显示出到其它已知的多晶或假晶形式的转化。已发现形式1和无定形形式在水存在下转化成形式2。

已确定CsA形式2的水合物形式的单晶结构并且表2中列出了晶体结构参数。这些结果指示相较于环孢霉素A的其它已知晶体形式，形式2是独特的。

表1：CsA形式2的晶体结构溶液的晶体数据和数据收集参数。

此CsA形式2的不对称单元含有一个环孢霉素A分子和两个水分子。可能的是，可与水氢键合的任何小分子可以起到空间填充物的作用，这将给出一系列潜在的结构，从斜方晶二水合物到变形的单斜晶二水合物。图9中示出了从单晶结构计算出的XRPD图案并且所述图案与图2中所示的实验图案相匹配。这些匹配图案进一步确证形式2是环孢霉素A的独特且纯的晶体形式。