[发明专利]用于炎性病症治疗的重组人α-1-抗胰蛋白酶

说明书

相关申请

本申请依据35U.S.C.§119要求于2011年12月19日提交的美国临时专利申请No.61/577,289的优先权，其全部内容引入本文作为参考。

技术领域

本发明涉及治疗炎性病症，其包括哮喘、气肿、慢性阻塞性肺病和慢性肉芽肿性肺病，即结节病。特别地，本发明涉及使用重组人α-1-抗胰蛋白酶治疗这些病症。

背景技术

重组蛋白质为许多危及生命的疾病提供有效治疗。使用高表达水平的系统例如细菌、酵母菌和昆虫细胞产生的治疗性蛋白质仅限于没有广泛翻译后修饰的小的蛋白质。产生许多所需要的翻译后修饰的哺乳动物细胞系统，由于需要复杂且高级的培养系统而更加昂贵。而且，在这些高级的细胞培养方法中，降低的蛋白质表达水平是常见的。一些哺乳动物细胞培养系统的局限性已通过在转基因哺乳动物或鸟类中重组蛋白质的表达而被克服。蛋白质产生于各种转基因动物的乳腺中，该动物具有的表达水平以每年数百公斤蛋白质的规模适用于成本效益生产。

发明概述

在一个方面，本公开提供了重组人α-1-抗胰蛋白酶(AAT)。在一个方面，重组产生的重组人α-1-抗胰蛋白酶(AAT)给药于需要AAT的患者。

出乎意料地，已发现在肺中给药重组人α-1抗胰蛋白酶(AAT)，相比给药相应剂量的血浆衍生的AAT，能提供较高效力。不受任何特定理论的限制，认为相比于血浆衍生的AAT的糖基化性质，在转基因山羊的奶中产生的重组AAT的糖基化性质提供了更高的肺中蛋白质定位。

在一个方面，本公开提供了包含α-1-抗胰蛋白酶(AAT)的组合物，其中该AAT是重组产生的。在一些实施方案中，AAT产生于非人类哺乳动物的乳腺上皮细胞中。在一些实施方案中，AAT产生于转基因非人类哺乳动物中。在一些实施方案中，所述非人类哺乳动物是山羊、绵羊、野牛、骆驼、牛、猪、兔、水牛、马、大鼠、小鼠或美洲驼羊。在一些实施方案中，该非人类哺乳动物是山羊。在一些实施方案中，重组产生的AAT与血浆衍生的AAT相比，其具有增强的脱氧己糖糖基化作用。在一些实施方案中，已将重组产生的AAT修饰，以增强其在AAT糖基序上的唾液酸化作用。

在一个方面，本公开提供了包含AAT的组合物，其中所述AAT具有高水平的脱氧己糖糖基化作用。在一个方面，本公开提供了包含AAT的组合物，其中所述AAT在AAT糖基序上具有高水平的唾液酸化作用。在一个方面，本公开提供了包含AAT的组合物，其中所述AAT具有高水平的脱氧己糖糖基化作用以及在AAT糖基序上具有高水平的唾液酸化作用。

在本文所述的任意AAT组合物的一些实施方案中，所述组合物还包含奶。在本文所述的任意AAT组合物的一些实施方案中，所述组合物还包含药学上可接受的载体。

在一个方面，本公开提供了产生本文所述组合物的AAT的乳腺上皮细胞。在一个方面，本公开提供了包含本文公开的乳腺上皮细胞的转基因非人类哺乳动物。

在一个方面，本公开提供了给药至有此需要受试者本文公开的AAT组合物的方法。在一些实施方案中，所述受试者具有α-1-抗胰蛋白酶缺乏症。在一些实施方案中，所述受试者具有炎性病症。在一些实施方案中，所述炎性病症为气肿。在一些实施方案中，所述组合物以30mg/kg至约60mg/kg AAT的剂量给药。在一些实施方案中，所述组合物由静脉给药。在一些实施方案中，所述组合物通过吸入给药。

在一个方面，本公开提供了降低肺内弹性蛋白酶活性的方法，该方法包括给予受试者足够量的本文公开的AAT组合物以降低肺内弹性蛋白酶活性。

附图说明

附图是示例性的，并且不是实施本发明所必须。

附图1描述了大鼠肺泡灌洗(BAL)样品的考马斯染色(Coomassie staining)(附图1A)和从BAL得到的AAT的染色的定量(附图1B和1C)。该样品依据从BAL得到的白蛋白进行标准化。

附图2描述了GRO/CINC-1酶联免疫吸附测定的水平(生长调节基因产物/细胞因子诱导的中性粒细胞趋化因子)，该水平与IL-8和用AAT处置的大鼠的支气管肺泡灌洗样品中的炎症模型相关。

附图3描述了对照AAT(电泳泳道2-5)和支气管肺泡灌洗得到的AAT(电泳泳道7-10)的弹性蛋白酶活性。弹性蛋白酶的结合由AAT的分子量的增加表征。