[发明专利]调节免疫反应的组合物和方法

说明书

技术领域

本发明涉及免疫调节领域，具体地说，涉及调节MHC I介导的免疫反应的组合物和方法。

背景技术

在初次免疫反应期间，树突状细胞为启动适应性免疫反应的主要抗原呈递细胞(APC)。树突状细胞吸收含有抗原蛋白质的死细胞和细胞残渣并加工这些外源衍生的抗原以用于呈递在MHC I上。这一过程称为MHC I交叉呈递。这一过程为对抗病毒、肿瘤、自抗原和同种异体移植物的CD8⁺T细胞介导的反应所必需。

CD74是树突状细胞内部工作的细胞机构的重要部分用于调节哺乳动物初次免疫反应。树突状细胞具有能够使其感应并接着响应外来威胁的专用途径。到目前为止，尚无人能够拼凑出使主要组织相容性I类(MHC I)能够发现并‘碰撞’外来侵入物引起免疫系统对病原体的必要呈递和识别的线路。

发明内容

本发明的一个目标是提供调节免疫反应的组合物和方法。根据本发明的一个方面，提供了一种刺激MHC I介导的免疫反应的方法，其包含在树突状细胞中刺激MHC I内溶酶体交叉呈递。刺激MHC I内溶酶体交叉呈递可包含在树突状细胞中过度表达CD74和/或将抗原靶向MHC I内溶酶体交叉呈递路径。

根据本发明的另一方面，提供了一种融合蛋白质，其包含抗原或其片段和CD74内溶酶体靶向序列。还提供了表达所述融合蛋白质的核酸分子、载体和细胞。

根据本发明的另一方面，提供了一种隔室，其用于CD74依赖性MHC I交叉呈递路径。这种隔室可能是内溶酶体。

根据本发明的另一方面，提供了一种组织蛋白酶裂解肽和所述肽的多联体，其用于刺激初次免疫反应。

附图说明

图1.Cd74^-/-小鼠产生较弱的抗病毒初次免疫反应。(a)在经低效价VSV(感染50％组织培养细胞单层或小鼠的2×10⁵剂量)感染后6天分离的Cd74^+/+、Cd74^-/-和Tap1^-/-小鼠的脾脏中产生VSVNP(52-59)特异性(H-2K^b-VSVNP)CD8⁺T细胞，接着用VSVNP(52-59)刺激5天。象限中的数字指示每次通过的细胞百分比。(b)在如a中获得的细胞中H-2K^b-VSVNP(52-59)特异性CD8⁺T细胞频率(n＝3种小鼠/基因型)。(c)在如a中VSV感染和体外加强之后产生的CTL的标准⁵¹Cr释放分析。*P<0.05(史都登氏t检验)。数据代表至少3次单独实验(平均值±s.d.)。

图2.Cd74^-/-小鼠在诱发初次免疫反应方面的缺陷在于其抗原呈递细胞且与CD4⁺T细胞无关。(a)从用VSV(感染50％组织培养细胞单层或小鼠的1×10⁵剂量)注射且在体外用VSVNP(52-59)加强的嵌合体(n＝3)获得的脾脏中产生VSVNP(52-59)特异性CD8⁺细胞。(b)在如a中体外加强之后产生的CTL的细胞毒性分析。目标细胞在指示时经VSVNP(52-59)脉冲处理或保持未标记作为非特异性杀伤的对照。(c)在如a中VSV感染和体外加强之后通过静脉内注射抗CD4(+Ab)耗尽CD4⁺细胞的Cd74^+/+→Cd74^-/-和Cd74^-/-→Cd74^+/+嵌合体(n＝3)的脾脏中产生对H-2K^b-VSVNP(52-59)具有特异性的CD8⁺T细胞。(d)在如c中体外加强之后产生的CTL的如b中的细胞毒性分析。*P<0.05(史都登氏t检验)。数据代表3次实验(a)、至少3次实验(b)、2次实验(c)或3次实验(d；平均值和s.d.)。