[发明专利]一种利用CdTe量子点和金纳米粒子的双信号法快速检测蔬菜中有机磷农药残留的方法

权利要求书

1.一种利用CdTe量子点和金纳米粒子的双信号法快速检测有机磷农药残留的方法，其特征在于利用金纳米粒子对CdTe量子点的荧光猝灭作用方法检测食品中有机磷农药的残留量，包括以下步骤：CdTe量子点的合成和纯化；金纳米粒子(AuNPs)的制备；通过测定荧光光谱图观察CdTe量子点与金纳米粒子的荧光内滤作用；通过测定荧光光谱图观察CdTe量子点、金纳米粒子、底物和酶体系的反应；运用金纳米粒子对CdTe量子点的荧光猝灭作用方法检测有机磷农药并进行实际样品的检测。

2.如权利要求1所述的方法，其中所述CdTe量子点的制备步骤如下：

首先称量0.0256g Te粉和0.0386g NaBH₄加入到三口烧瓶中，用高纯水配制pH＝11的NaOH溶液100mL，向其中通入10min N₂，装于一恒压滴定漏斗①中，用高纯水配制浓度为4×10^-3mol/L的CdCl₂溶液100mL，加入67μLTGA，用1mol/L的NaOH溶液调节pH＝11，向其中通入10minN₂，将得到的澄清透明溶液装于另一恒压滴定漏斗②中，将整个装置与真空、N₂系统连接起来，经历几次抽真空和通N2的步骤除去体系中的O₂；略微加热，打开漏斗①，加入3～5滴水，电磁搅拌，引发反应，待Te粉基本反应完全后(溶液为红色并且黑色粉末消失)，将①中的水全部加入，得到透明浅红色溶液，再将②中溶液全部加入，整个过程都进行N₂保护；溶液全部加入后继续搅拌10min，撤去N₂保护，将得到的混合溶液用50％的微波功率输出加热进行晶体生长反应；得到的产物加入等体积的异丙醇洗涤，并离心除去过量前体，最后将其再分散在200mL的纯净水中。

3.如权利要求1所述的方法，其中所述金纳米粒子(AuNPs)的制备和透射电镜表征步骤如下：

所有的玻璃器皿都经过王水浸泡，双蒸水清洗，晾干备用，配制试剂所用蒸馏水需通过0.45μm的滤膜过滤；制备时，向洁净的三口烧瓶中加入1mmol/L的氯金酸50mL，在搅拌的情况下使其沸腾，紧接着快速加入38.8mmol/L的柠檬酸三钠5mL，边加热边搅拌，溶液由淡黄色变成酒红色，反应持续10分钟，停止加热，溶液冷却至室温后，用0.45μm的微孔膜过滤，4℃保藏，所制得的金纳米粒子粒径为13nm。

①样品制备

吸取13nm金纳米粒子180μL，娃哈哈纯净水720μL，含有15μM碘化乙酰硫代胆碱的PBS(10mM，pH＝8.0)100μL，500mU/mL的乙酰胆碱酯酶10μL于2mL离心管中，作为对照，另一离心管中不加底物和乙酰胆碱酯酶，在25℃下同时培养10min；将两种样品分别滴于两个铜网上，室温晾干备用；

②参数

用TECNAI F20透射电镜于200kV的加速电压下扫描样品①的透射电镜。

4.如权利要求1所述的方法，其中所述通过测定荧光吸收光谱观察CdTe量子点与金纳米粒子的荧光内滤作用的步骤如下：

在六个离心管(2.0mL)中分别依次加入CdTe量子点1mL，13nmAuNPs(1，0.9，0.8，0.7，0.6，0.5，0.4，0.3，0.2，0.1，0mL)，娃哈哈纯净水(0.72，0.82，0.92，1.02，1.12，1.22，1.32，1.42，1.52，1.62，1.72mL)，测荧光光谱图。

5.如权利要求1所述的方法，其中所述通过测定荧光光谱图观察CdTe量子点、金纳米粒子、底物和酶体系的反应的步骤如下：

在四个试管(2.0mL)中分别依次加入CdTe量子点1mL，13am的金纳米粒子1mL，娃哈哈纯净水0.5mL，含有20μM碘化乙酰硫代胆碱的磷酸盐缓冲液(PBS，10mM，pH＝8.0)200μL，再依次加入不同浓度的AChE(200，400，600，800，1000，1200，1500mU/mL)20μL，然后将混合物在25℃下培养5min，测荧光吸收光谱。