[发明专利]一种石蜡细胞芯片接种方法有效
申请号: | 201310002236.4 | 申请日: | 2013-01-04 |
公开(公告)号: | CN103091151A | 公开(公告)日: | 2013-05-08 |
发明(设计)人: | 侯英勇;石园;胡沁;何德明;蒋冬先;宿杰阿克苏;曾海英;谭云山 | 申请(专利权)人: | 复旦大学附属中山医院 |
主分类号: | G01N1/36 | 分类号: | G01N1/36 |
代理公司: | 上海申汇专利代理有限公司 31001 | 代理人: | 翁若莹;王婧 |
地址: | 200032 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 石蜡 细胞 芯片 接种 方法 | ||
1.一种石蜡细胞芯片接种方法,其特征在于,具体步骤为:
第一步:将细胞用福尔马林固定过的肠衣包裹,随同病理科常规组织处理程序进行处理,至浸蜡的步骤,得到浸好蜡的细胞标本;
第二步:将浸好蜡的细胞标本连同肠衣加热至融化状态,打开肠衣,将细胞及液态石蜡刮入EP管,混匀后,塑形成所需形状的细胞芯片,留存;
第三步:将蜡加热直至融化状态,将蜡模制备框放在蜡模板上,将蜡倒入蜡模制备框中聚合,待蜡聚合后,放入-10℃~-20℃冰箱2~10min,取出,撤下蜡模板;
第四步:将所得的蜡模连同蜡模制备框放置于50~70℃孵箱中5~8min,使蜡模略变软后取出,在蜡模的接种范围内钻孔,将第二步所得的细胞芯片种入蜡模相应的孔中;
第五步:将第四步中所得的蜡模放在恒温孵育箱内聚合,升温至54~56℃,1~3h后停止加热,自然冷却;
第六步:将蜡模和蜡模制备框置入-10℃~-20℃冰箱10~20min,取出后,侧敲蜡模制备框,将蜡模与蜡模制备框分离,将所得的蜡模切片后,即得石蜡细胞芯片。
2.如权利要求1所述的石蜡细胞芯片接种方法,其特征在于,所述第二步中的细胞柱的形状为长方体形、正方体形、管状或柱状。
3.如权利要求1所述的石蜡细胞芯片接种方法,其特征在于,所述第三步中的蜡模制备框为耐高温材料制作,长为30mm~40mm,宽为15mm~30mm,高为10mm~15mm,壁厚为2mm~4mm。
4.如权利要求1所述的石蜡细胞芯片接种方法,其特征在于,所述第三步中的蜡模板为耐高温材料制作,长为60mm~70mm,宽为30mm~40mm,厚为5mm~10mm,其中央设有一个由四条凹槽围成的长方形区域,所述的凹槽的宽为2mm~4mm,深为1mm,凹槽可与蜡模框嵌合,长方形区域的长为30mm~40mm,宽为15mm~30mm,长方形区域内设有4~10条横向凹槽及6~15条纵向凹槽,横向凹槽和纵向凹槽将长方形区域分隔成24~150凸出的网格,网格长1mm~3mm,宽1mm~3mm,其中横向第一排网格表面刻有镜像数字或镜像字母状凹陷,纵向第一排第二个网格起刻有镜像字母或镜像数字状凹陷,其余网格表面有一直径为1mm的圆形凸起。
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