[发明专利]一种天然柠檬消毒剂及其制备方法

权利要求书

1.一种天然柠檬消毒剂的制备方法，其特征在于，新鲜柠檬加入水－甘油提取液，并用热带假丝酵母-粪链球菌发酵，挤压过滤，分离出的提取溶液经检验酸度和维生素C含量合格后，灌装，室温保存。

2.根据权利要求1所述的天然柠檬消毒剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）将新鲜柠檬洗净、去残、绞碎，按质量比加入10-15倍的水－甘油溶液，按质量比接入1-1.5倍的热带假丝酵母-粪链球菌的混合菌液，28-32℃，100-150r/min,发酵20-24h；

（2）无菌条件下，抽样检查，取10mL柠檬发酵液稀释100倍在660nm波长下测定吸光值OD，OD值达到0.5-0.7后，结束发酵过程，加热至80-85℃保持10-15min杀菌；

（3）将柠檬发酵液挤压过滤，弃滤渣，收集滤出液，检验酸度和维生素C含量合格后，灌封分装，即制备成天然柠檬消毒剂。

3.根据权利要求2所述的天然柠檬消毒剂的制备方法，其特征在于，所述热带假丝酵母-粪链球菌的混合菌液的制备方法包括以下步骤：

（1）按微生物发酵工程工艺，先将斜面保存热带假丝酵母菌种用马铃薯培养基PDA活化，经三级逐级扩大培养，制备成热带假丝酵母的一级种子菌液；同理，粪链球菌用牛肉膏蛋白胨培养基活化，经过三级逐级扩大培养，制备成粪链球菌的一级种子菌液；

（2）将步骤（1）得到的热带假丝酵母和粪链球菌的一级种子菌液用玉米粉-豆粕-马铃薯-蔗糖培养基进行二级、三级扩大培养；

所述二级扩大培养条件：将热带假丝酵母和粪链球菌的一级种子液等体积混合，按接种量质量比1:10两种菌的一级种子混合菌液，温度28-30℃，转速100-200r/min,压力0.05MPa，发酵20-24h,抽取10mL发酵液，稀释100倍，检查波长660nm吸光值，吸光值达到0.6-0.8后，再转入三级扩大培养阶段；

所述三级扩大培养条件：按接种量质量比1:10二级扩大培养液，温度28-30℃，转速200-300r/min,压力0.05MPa，发酵20-24h,抽取10mL发酵液，稀释100倍，检查波长660nm吸光值，达到0.6-0.8后，停止培养,有效菌菌落数2*10⁹cfu.mL^-1以上。

4.根据权利要求3所述的天然柠檬消毒剂的制备方法，其特征在于，所述玉米粉-豆粕-马铃薯-蔗糖培养基组成按质量份数为：玉米粉20-30份,豆粕2份，马铃薯10-20份，蔗糖2份，氯化钠0.5份,磷酸氢二钾0.5份,硝酸钾10份，硫酸镁0.5份,硫酸亚铁0.002份,自来水1000份，用过饱和氢氧化钙调节pH值7.4-7.6。

5.根据权利要求1或2所述的天然柠檬消毒剂的制备方法，其特征在于，所述经检验酸度和维生素C含量合格是指：酸度的pH值2.5-3.5；维生素C含量质量浓度为150～200mg.L^-1。

6.根据权利要求2所述的天然柠檬消毒剂的制备方法，其特征在于，所述水－甘油溶液为按质量比水：甘油=1：1。

7.一种权利要求1-6任一项方法制备的天然柠檬消毒剂。