[发明专利]一种高效秸秆腐熟剂及其制备工艺有效
申请号: | 201310005278.3 | 申请日: | 2013-01-07 |
公开(公告)号: | CN103031254A | 公开(公告)日: | 2013-04-10 |
发明(设计)人: | 汪丽刚;程玉海;王慧芳;王建红 | 申请(专利权)人: | 鹤壁市人元生物技术发展有限公司 |
主分类号: | C12N1/00 | 分类号: | C12N1/00;C12N1/14;C12N1/16;C12N1/20;C05F11/08;C12R1/125;C12R1/465;C12R1/645;C12R1/72;C12R1/685;C12R1/69;C12R1/79;C12R1/885 |
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地址: | 458000 河南*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 高效 秸秆 腐熟 及其 制备 工艺 | ||
1.一种高效秸秆腐熟剂,其特征在于:包括以下重量百分比的原料:枯草芽孢杆菌20-30%、白浅灰链霉菌10-15、扣囊拟内孢霉5-10%、产朊假丝酵母5-10%、曲霉10-15%、淡紫拟青霉10-15%、哈茨木霉10-15%、嗜热霉菌20-30%。
2.根据权利要求1所述的一种高效秸秆腐熟剂,其特征在于:所述的曲霉是黑曲霉、米曲霉中的一种。
3.根据权利要求1所述的一种高效秸秆腐熟剂,其特征在于:所述的嗜热霉菌是生长温度在45-50℃之间的嗜热侧孢霉。
4.一种如权利要求1所述的高效秸秆腐熟剂的制备工艺,其特征在于:其制备工艺如下:
1)斜面培养:在无菌条件下,将曲霉、淡紫拟青霉、哈茨木霉接种在PDA-蔗糖培养基上,在32℃条件下培养4天;将嗜热侧孢霉、扣囊内孢霉、产朊假丝酵母接种在PDA-葡萄糖培养基上,在32℃条件下培养3天;将嗜热霉菌在45℃条件下培养3天;将枯草芽孢杆菌接种在营养琼脂培养基上,在30℃条件下培养3天;将白浅灰链霉接种在高氏一号培养基上,在30℃条件下,培养5天;
2)种子培养:将步骤1)中培养的菌种在无菌条件下分别接种于液体扩增培养基中,其中将曲霉、淡紫拟青霉、哈茨木霉接种在PDA-蔗糖培养基上,在32℃、频率为150r/min摇床中培养4天;将白浅灰链霉菌接种在高氏一号培养基上,在30℃、频率为150r/min摇床中培养5天;将枯草芽孢杆菌接种在营养琼脂培养基上,在30℃、频率150r/min摇床中培养3天;将扣囊内孢霉、产朊假丝酵母接种在PDA-葡萄糖培养基上,在32℃条件下培养3天;将嗜热侧孢霉接种在PDA-葡萄糖培养基上,在32℃、150r/min摇床中培养3天;
3)固体增殖培养基:把步骤2)中培养好的液体种子在无菌条件下接到经高压灭菌的固体培养基中,培养3-7天,其中枯草芽孢杆菌的固体增殖培养基为含28%重量百分比的锯末、10%重量百分比的豆粕、60%重量百分比的麸皮、1.5%重量百分比的硫酸铵、0.5%重量百分比的磷酸氢二钾、0.2%重量百分比的氢氧化钠、50-60%重量百分比的水的固态发酵培养基,枯草芽孢杆菌以4-10%的接种量,控制环境温度在28-32℃,培养3天使得达到菌含量大于10亿/g;
白浅灰链霉菌的固体增殖培养基为含20%重量百分比的锯末、50%重量百分比的麸皮、20%重量百分比的玉米面、10%重量百分比的豆粕、0.2%重量百分比的氢氧化钠组成的培养基,以4-10%的接种量,控制环境温度在28-32℃,培养3-5天使得菌含量大于5亿/g;
嗜热侧孢霉的固体增殖培养基为含40%重量百分比的锯末,40%重量百分比的麸皮,20%重量百分比的豆粕,0.5%重量百分比的磷酸氢二钾、50-60%重量百分比的水的固态发酵培养基,液体种子以2-10%的接种量, 在45℃以上条件下,培养3天使得菌含量达到大于10亿/g;
扣囊内孢霉、产朊假丝酵母固体增殖培养基为含60%重量百分比的麸皮、10%重量百分比的豆粕、20%重量百分比的玉米面、10%重量百分比的稻壳、50-60%重量百分比的水的固态发酵培养基中,以4-10%的接种量,控制环境温度在28-32℃,培养3-5天,使得扣囊内孢霉能达到菌含量大于15亿/g、产朊假丝酵母菌含量大于2亿/g;
曲霉、哈茨木霉的固体增殖培养基为含50%重量百分比的麸皮、40%重量百分比的豆粕、10%重量百分比的稻壳、40%重量百分比的水的固体培养基,以5-10%的接种量,控制环境温度在28-32℃,培养5-7天,使得曲霉菌含量大于5亿/g、哈茨木霉菌含量大于5亿/g;
淡紫拟青霉的固体增殖培养基为含50%重量百分比的稻壳、20%重量百分比的豆粕、30%重量百分比的玉米面、40%重量百分比的水的固体培养基,以5-10%的接种量,控制环境温度在28-32℃,培养5-7天,使得淡紫拟青霉菌含量大于2亿/g;
4)干燥处理:3)步骤的固体增殖培养完毕后将其放入干燥室进行干燥,
干燥后的菌剂经过粉碎过筛,即可作为原菌剂保存使用。
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