[发明专利]白花灯台报春的组织培养方法

说明书

技术领域：

本发明属于植物生物技术中植物组织培养方法，具体地，涉及白花灯台报春的组织培养快繁方法。

背景技术：

白花灯台报春(Primula beesiana var. leucantha (Balf. f. et Forr.) Fletcher) 属于报春花科报春花属植物，花白色，其属于霞红灯台报春(Primula beesiana Forr.) 的一个变种，主要分布于云南丽江玉龙雪山及四川省的木里县，通常与霞红灯台报春混生在一起，在较大的霞红灯台报春群落中偶见，更确切地说其是霞红灯台报春的一个变型。报春花属植物花一般为粉红色、紫色或黄色，白色花种类在野外及已培育出来的品种中非常少见，因而白花灯台报春在园林园艺应用上为不可多得的报春花属植物。据观察发现，虽然白花灯台报春在野外能够正常开花，但由于其在野外的数量非常稀少，生殖隔离严重，其与一起混生的霞红灯台报春之间又没有合适的共有传粉昆虫，因而在野外很少结能育的果实。种子的缺乏给本种的繁育带来了困难，进而也使本种在野外的种群数量越来越少，目前已趋于濒危的边缘。报春花属植物组培相关方面虽有报道，如中国专利申请号为200710064057.8的桔红灯台报春的组培快繁方法、申请号为200710064055.9的海仙报春的组培快繁方法以及申请号为200710064056.3的滇北球花报春的组培快繁方法，虽然增殖强度也较大，但三者增殖与生根采用不同的培养基。迄今，还没有白花灯台报春生物技术方法繁殖的相关研究报道。

为了使白花灯台报春(Primula beesiana var. leucantha (Balf. f. et Forr.) Fletcher)在野外繁殖种源缺少的情况下，能成功进行繁殖使之能够保存和可持续利用，需要研究该种的组织培养，并形成一套专门的组织培养繁殖技术体系。

发明内容：

本发明的目的是提供濒危植物白花灯台报春(Primula beesiana var. leucantha (Balf. f. et Forr.) Fletcher)的组织培养繁育方法，使之在存在生殖隔离不能有效产生能育种子的情况下能够繁衍，使该物种的种质资源保存能够得到保障，同时采用了增殖生根一体培养基，缩短离体培养时间，提高生根率和幼苗移栽率，为濒危物种白花灯台报春的可持续利用奠定组培种苗繁育基础。

为了实现本发明的目的，本发明提供了如下的技术方案：

白花灯台报春的组培繁殖方法，包括选择外植体、消毒、丛生芽诱导，增殖生根培养，试管苗移栽步骤。外植体取白花灯台报春的茎尖，丛芽诱导培养基为MS+1.0mg/l ZT+1.0 KT+0.2mg/l NAA，pH5.8，丛芽增殖及生根转接入MS+1.5mg/l 6BA+1.0mg/l ZT+0.2mg/l NAA，pH5.8中进行，以上培养过程均在温度20-25℃，湿度为30%-45%，光照条件为自然光100-150LUX+1500-2000LUX下进行。

所述外植体消毒先用自来水滴加洗洁精2-3滴浸泡2-3分钟，用流动的自来水冲洗10分钟，然后用75%酒精进行表面消毒后用无菌水冲洗3-5遍，再用0.1%升汞溶液进行消毒7-8分钟，在无菌条件下用无菌水反复冲洗3-5遍，用滤纸吸干表面水分。

所述丛芽诱导和增殖及生根培养的温度为20-25℃，湿度30-45%。 

所述丛芽诱导和增殖及生根培养的光照条件为自然光100-150LUX+1500-2000LUX。

移栽是生根组培苗在培养瓶内培养30天以后，在炼苗棚驯化15-20天，再移栽于温室大棚。

移栽基质为珍珠岩:腐殖土:红土=1:1:2，pH为5.5-6.0。

移栽在早上8-11点，温度为18-25℃下进行。