[发明专利]烟草脉带花叶病毒侵染性克隆的构建及应用无效
申请号: | 201310009341.0 | 申请日: | 2013-01-10 |
公开(公告)号: | CN103031325A | 公开(公告)日: | 2013-04-10 |
发明(设计)人: | 李向东;高瑞;田延平;刘焕庭 | 申请(专利权)人: | 山东农业大学 |
主分类号: | C12N15/63 | 分类号: | C12N15/63;C12N15/66;C12N15/82;A01H5/00 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 271018 *** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 烟草 花叶 病毒 侵染 克隆 构建 应用 | ||
1.一种烟草脉带花叶病毒的侵染性克隆,其序列如Seq ID No:14所示。
2.根据权利要求1所述的载体,其特征在于可通过以下步骤获得:
(1)烟草脉带花叶病毒病毒粒子的提取,可采用常规提取方法进行;
(2)从病毒粒子中提取病毒RNA,设计引物分三段对烟草脉带花叶病毒基因组进行PCR扩增。利用Overlap-PCR方法分别将35S启动子融合到烟草脉带花叶病毒的5′末端;
(3)用限制性酶切的方法将全长cDNA克隆连接到pCambia0390载体,获得pCamTVBMV。
3.如权利要求1所述载体在表达外源蛋白方面的应用。
4.如权利要求1所述载体在保护植物免受病毒强毒株系侵染方面的应用。
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