[发明专利]一种从酵母菌体中纯化还原型谷胱甘肽的方法无效
申请号: | 201310010072.X | 申请日: | 2013-01-10 |
公开(公告)号: | CN103923167A | 公开(公告)日: | 2014-07-16 |
发明(设计)人: | 张惠文;王硕;徐明恺;张成刚;苏振成 | 申请(专利权)人: | 中国科学院沈阳应用生态研究所 |
主分类号: | C07K5/037 | 分类号: | C07K5/037;C07K1/36;C07K1/18;C07K1/16 |
代理公司: | 沈阳科苑专利商标代理有限公司 21002 | 代理人: | 周秀梅;李颖 |
地址: | 110164 辽宁省*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 酵母 菌体 纯化 原型 谷胱甘肽 方法 | ||
1.一种从酵母菌体中纯化还原型谷胱甘肽的方法,其特征在于:将酿酒酵母菌泥经酸性热水抽提离心,收集上清液调节pH至酸性后经阳离子交换树脂纯化,并以可挥发性铵盐或可挥发性无机酸溶液进行洗脱,洗脱组分再经凝胶柱纯化洗脱,洗脱组分即为还原型谷胱甘肽。
2.按权利要求1所述的从酵母菌体中纯化还原型谷胱甘肽的方法,其特征在于具体为:
1)将酿酒酵母菌泥加入水中并调节pH至酸性,再经加热浸提将菌液放置于沸水浴中浸提后置于冰浴冷却至室温,待用;
2)将上述冷却后浸提液离心,收集富含谷胱甘肽的上清液,上清液中通入惰性气体;
3)将上述上清液采用阳离子交换树脂上进行吸附,并以可挥发性铵盐或可挥发性无机酸溶液洗脱,收集富含谷胱甘肽的收集液,收集液减压蒸干固体,待用;
4)将上述减压蒸干固体溶于水中并充入惰性气体,而后经凝胶柱纯化洗脱,洗脱组分真空浓缩,浓缩液经醇重结晶,结晶液减压蒸干,获得白色粉末状谷胱甘肽纯品固体。
3.按权利要求1或2从酵母菌体中纯化还原型谷胱甘肽的方法,其特征在于:将酿酒酵母的发酵液以滤膜压滤方式获得菌泥,即酿酒酵母菌泥;按质量比1:4的比例将菌泥与去离子水混合,并用无机酸调节pH至1.0-3.0,而后加热至85-95℃于沸水浴中浸提,浸提后采用冰浴冷却至室温。
4.按权利要求3从酵母菌体中纯化还原型谷胱甘肽的方法,其特征在于:所述压滤的滤膜孔径为0.22μm-10.0μm;无机酸为硫酸,硝酸或盐酸。
5.按权利要求1或2从酵母菌体中纯化还原型谷胱甘肽的方法,其特征在于:将上述冷却后浸提液离心,收集富含谷胱甘肽的上清液,上清液采用无机酸调节pH至1.0-3.0,而后以01.-0.5mL/s充气速度将惰性气体通入其中。
6.按权利要求5从酵母菌体中纯化还原型谷胱甘肽的方法,其特征在于:所述无机酸为硫酸,硝酸或盐酸。
7.按权利要求1或2从酵母菌体中纯化还原型谷胱甘肽的方法,其特征在于:所述可挥发性铵盐或可挥发性无机酸溶液为氯化铵、碳酸氢铵、氨水或盐酸。
8.按权利要求2从酵母菌体中纯化还原型谷胱甘肽的方法,其特征在于:所述步骤3)和步骤4)减压蒸干的条件,真空度为-0.79Mpa—-0.04Mpa加热温度为50-60℃。
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