[发明专利]一种基于普洱茶主要成分的组合物及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种基于普洱茶主要成分的组合物及其应用，更具体地说，本发明涉及该组合物在预防DNA毒性的化学物质生物危害中的应用。

背景技术

DNA毒性或基因毒性(genotoxic)的化学物质，是指一大类可以导致DNA损伤，进而导致基因突变、细胞死亡或肿瘤发生的化学物质。其中包含直接结合到DNA上，对DNA进行化学修饰，导致DNA损伤；或作用于DNA结合相关蛋白，对DNA造成损伤等。大部分致畸、致突、致癌的化合物都属于这一类，这类化合物也是人们日常生活中经常遇到的，如汽车尾气，香烟烟雾、厨房油烟等等。

由于肿瘤细胞异常活跃的增殖能力，细胞内DNA复制非常活跃，也成为这类基因毒性化合物的主要靶点。目前，临床上普遍应用的肿瘤化疗药物，如顺铂及其衍生物卡铂，环磷酰胺，阿霉素等等，都是这一类的化合物。由于这些化合物对正常细胞的DNA也有损伤，接受化疗的肿瘤病人通常会出现严重的毒副作用，如白细胞下降、呕吐、腹泻等等。

因此，DNA毒性化合物对人类的生物毒性作用越来越受到人们的广泛关注，如何预防其致畸、致突、致癌作用也已成为人们广泛关注的话题。在临床上，如何减轻化疗的毒副作用也已成为重要的问题。研发防治DNA毒性化合物对人类危害的保健品，有重要的社会和经济价值。

普洱茶是以云南原产地的大叶种晒青茶加工而成，是人们常用的茶饮料。普洱茶具有性温味香，解油腻牛羊毒，苦涩逐痰，刮肠通泄等功效。现代生物医学研究也表明，普洱茶具有降血糖、降血脂、降血压、抗炎等功效，使普洱茶成为人们喜爱的保健饮品。但迄今为止，普洱茶用于预防DNA毒性化合物的生物危害尚未发现相关资料报导。

发明内容

本发明的目的在于提供一种基于普洱茶主要成分的组合物，该组合物的组成成分及其质量百分比为：5-50％茶褐素、5-40％茶多糖、10-50％茶多酚、5-30％咖啡因、0.1-2％γ-氨基丁酸和0.1-2％没食子酸。

本发明另一目的是提供一种基于普洱茶主要成分的组合物新用途，即以基于普洱茶主要成分的组合物作为有效成分，在制备预防DNA毒性化学物质的生物危害的药物中的应用。

将基于普洱茶主要成分的组合物应用在制备增强化疗药物对肿瘤细胞的杀伤作用，增强肿瘤细胞对化疗药物敏感性的药物，以及用于制备保护化疗药物对肿瘤病人正常细胞的毒副作用药物中的应用。

本发明的基于普洱茶主要成分的组合物作为其新用途的主要活性成分，可进一步将组合物制成浸膏、丸剂、口服液、片剂、针剂、皮肤护理用品等衍生产品，其中可添加一种或多种药物上可接受的辅料，以改善衍生产品的吸收效果或便于服用。

本发明另一目的是将基于普洱茶主要成分的组合物应用在制备预防DNA毒性化学物质生物危害的保健品或日用品中，即以本发明组合物作为主要有效活性成分，将组合物制成保健品或日用品，必要时添加一些保健品或日用品中可接受的辅料，用于日常生活中预防DNA毒性化学物质对正常细胞的毒性。

本发明利用野生型的小鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryo fibroblast，MEF)测试DNA毒性化合物对正常细胞的杀伤作用，同时测试基于普洱茶主要成分的组合物对正常细胞的保护作用，从而揭示这种组合物在预防DNA毒性化合物生物危害的功效。

本发明利用Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒检测DNA毒性化学物质处理后细胞的凋亡及本发明组合物的保护作用；

检测所依据的原理如下：Annexin V选择性结合磷酯酰丝氨酸，磷酯酰丝氨酸主要分布在细胞膜内侧，即与细胞浆相邻的一侧，在细胞发生凋亡的早期，不同类型的细胞都会把磷酯酰丝氨酸外翻到细胞表面，即细胞膜外侧；磷酯酰丝氨酸暴露到细胞表面后会促进凝血和炎症反应；而Annexin V和外翻到细胞表面的磷酯酰丝氨酸结合后可以阻断磷酯酰丝氨酸的促凝血和促炎症反应活性；用带有绿色荧光的荧光探针FITC标记的Annexin V，即AnnexinV-FITC，就可以用流式细胞仪或荧光显微镜非常简单而直接地检测到磷酯酰丝氨酸的外翻这一细胞凋亡的重要特征，用Annexin V-FITC和碘化丙啶染色后，正常的活细胞不被AnnexinV-FITC和碘化丙啶染色；凋亡早期的细胞仅被Annexin V-FITC染色，碘化丙啶染色呈阴性；坏死细胞和凋亡晚期的细胞可以同时被Annexin V-FITC和碘化丙啶染色。