[发明专利]通过三官能双特异性抗体破坏表达低至中等水平的肿瘤相关靶抗原的肿瘤细胞

说明书

本申请是申请日为2007年2月15日、标题为“通过三官能双特异性抗体破坏表达低至中等水平的肿瘤相关靶抗原的肿瘤细胞”的中国专利申请No.200780012777.8的分案申请。 

本发明涉及三官能双特异性抗体用于制备预防和治疗肿瘤疾病的药物组合物的应用。 

在免疫治疗过程中通过单特异性单克隆抗体治疗肿瘤中的一个迄今尚未解决的问题是对具有低至中等表达水平的肿瘤靶抗原的肿瘤细胞破坏的功效不足性。一个具体的实例是对具有低至中等表达水平的靶抗原Her2/neu的乳腺癌的治疗；另一个具体的实例是对具有低表达水平的CD20肿瘤抗原的非霍奇金淋巴瘤和慢性淋巴白血病的治疗。 

转移性乳腺癌是几乎总是致死性的疾病。从转移的第一次表现起的平均存活时间在17到20个月范围内。许多内分泌、细胞毒性和生物学试剂已经表现出减轻的功效，但是不存在一致的护理标准，并且治疗通常引起实质上的副作用。 

表皮生长因子(EGF)家族成员Her2/neu在大约25-30％的乳腺癌患者的肿瘤标本中过量表达，并且其归因于更具攻击性的肿瘤生长和更坏的预后。 

EGF受体家族包括4个成员：EGFR(ERBBl)，Her2/neu(ERBB2)，ERBB3和ERBB4。EGFR和Her2/neu已被作为治疗靶点进行集中研究。靶向EGFR和Her2/neu的其余的细胞结构域的抗体以及抑制细胞内受体信号传导的小分子化合物已经用于临床应用，并且已经表现出临床功效。然而，它们的抗肿瘤作用通常不如临床前研究预测的那样强，并且优选与化学治疗结合。 

是广泛用于乳腺癌治疗的公认的单克隆抗体；然而， 只可以成功地用于在他们的肿瘤细胞上具有至少2+/FISH+(其 通过所谓的和阳性FISH-分析验证)或3+的靶抗原Her2/neu表达水平的患者。一些研究已经表明，为了获得统计学显著的存活，具有Her2/neu的额外基因扩增(通过阳性FISH检测反映)的靶抗原Her2/neu的相对高的表达密度是必需的。临床前体外实验还表明对肿瘤细胞的有效破坏只在肿瘤细胞表达高水平的靶抗原Her2/neu时是明显的。 

这些限制是只有大约25-30％的患有在他们的肿瘤上表达高水平的Her2/neu(用Dako HercepTest得分2+/FISH+或3+)的转移性乳腺癌的患者可以有效地使用进行治疗的原因。 

在Perez和同事的研究中，使用免疫组织化学(IHC)评估，35％的乳腺癌患者得分为Her21+，14％为2+，和13％为3+(Perez EA等：Her2 testingin patients with breast cancer：poor correlation between weak positivity byimmunohistochemistry and gene amplification by fluorescence in situhybridization(在患有乳腺癌的患者中的Her2检测：通过免疫组织化学的弱阳性和通过原位杂交荧光的基因扩增之间的弱相关性).Mayo ClinProc(Mayo临床进展)2002；77：148-154)。 

Kiewe，P.等：“Phase I trial of the trifunctional anti-Her2x anti-CD3antibody ertumaxomab in metastatic breast cancer(三官能抗-Her2x 抗-CD3抗体ertumaxomab在转移性乳腺癌中的I期试验)”；Journal ofClinical Oncology(临床肿瘤学杂志)，第23卷，编号16S，2005年6月1日(ASCO摘要2205-06-01)描述了靶向Her2/neu和CD3的完整双特异性单克隆抗体的应用。这种抗体用于治疗转移性乳腺癌的I期试验中。为了研究通过这种抗-Her2/neu x抗-CD3抗体引起的任何副作用，和为了加快招募必要数目的17名患者，检测了具有得分1+(25％)，2+(12,5％)和3+(62,5％)的患者。在这一初步的结果分析中在15名可评价的患者中有4名观察到抗肿瘤反应。然而，落入得分1+内的这些患者没有一名表现出抗肿瘤反应。完全没有给出关于这些反应者的Her2/neu表达状态的信息。另外，在这种I期研究的设计时，只有ertumaxomab消除表达高水平(3+得分)的Her2/neu的细胞系(例如，Sk-Br-3)的实验数据是可用的。