[发明专利]一种抗肿瘤蛋白质有效
申请号: | 201310015845.3 | 申请日: | 2013-01-17 |
公开(公告)号: | CN103113468A | 公开(公告)日: | 2013-05-22 |
发明(设计)人: | 陈国江;韩根成;王仁喜;肖鹤;侯春梅;黎燕;冯建男;沈倍奋;王一;王柯;刘桂君 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军军事医学科学院基础医学研究所 |
主分类号: | C07K14/71 | 分类号: | C07K14/71;C12N15/12;C12N15/11;C12N15/70;A61K38/17;A61P35/00 |
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地址: | 100850 北京市*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 肿瘤 蛋白质 | ||
1.一种抗肿瘤蛋白质,其特征在于,所述的蛋白质其氨基酸序列如序列表SEQ ID NO:6所示。
2.根据权利要求1所述的蛋白质,其特征在于,所述的蛋白质其核苷酸序列如序列表SEQ ID NO:5所示。
3.一种扩增权利要求2所述蛋白质核苷酸序列的引物,其特征在于,所述引物包括上游引物和下游引物,其序列如序列表SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4所示。
4.一种制备权利要求1或2所述蛋白质的方法,包括以下步骤:
1)根据PDGFRL基因序列分析其蛋白活性区域,并设计引物,所述引物的序列如序列表SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4所示,通过PCR方法扩增目的基因片段,将扩增的目的片段连接到载体上,得到的重组质粒转化到克隆细胞中,提取重组质粒并测序,同时扩增PDGFRL全长基因作为阳性对照;
2)将测序正确含有目的基因的表达载体转化到相应的表达细胞中,诱导表达目的蛋白,获得PDGFRL全长蛋白及其活性区域蛋白,制备蛋白样品,测蛋白浓度;
3)将上一步得到的蛋白质,通过SDS-PAGE及Western Blot鉴定,检测所得蛋白是否表达成功。
5.权利要求4所述的方法,其特征在于,所述的载体为Pet28a(+)。
6.权利要求4所述的方法,其特征在于,所述的表达细胞为E.coli BL21(DE3)。
7.一种药物组合物,其特征在于,所述的药物组合包含权利要求1或2所述的蛋白质。
8.权利要求1或2所述蛋白质在制备治疗肿瘤疾病药物中的应用。
9.根据权利要求6所述的应用,其特征在于,所述的肿瘤为结肠癌。
10.根据权利要求6所述的应用,其特征在于,所述的肿瘤为乳腺癌。
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