[发明专利]一种源于棘孢曲霉的苯醌螺环化合物及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种源于棘孢曲霉的苯醌衍生物及其应用。 

背景技术

棘孢曲霉(Aspergillus aculeatus)是许多生物活性化合物的来源，之前对棘孢曲霉的化学研究揭示了其次级代谢产物有较好的抗菌、抗真菌、抗病毒、杀虫、抗肿瘤等活性，这些活性化合物按其架构类型可分为肽类，生物碱类，倍半萜类，脂肪酸类，氧杂蒽酮类，然而苯醌与苯环通过氧桥相连的结构在文献中鲜有报道。本发明人研究得知，棘孢曲霉(Aspergillus aculeatus) IBPT-3 (2012年12月24日保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号是：CCTCC NO：M 2012544)的发酵产物的粗提取物有很好的细胞增殖抑制活性，遂对其活性成分进行研究。研究发现所示苯醌类化合物具有抗肿瘤活性，目前尚未见该化合物的化学结构及细胞增殖抑制活性的报道，因此市场上也尚未见有与此相关的药物。 

发明内容

本发明的目的在于提供一种源于棘孢曲霉的苯醌衍生物及其应用。该化合物具有抑制肿瘤细胞增殖作用，具有抗肿瘤活性。其结构式为： 

。

其结构特征是：含有一个苯醌与苯环通过羰基和氧桥相连的螺环结构的分子骨架、分子中四个甲基均处于对位，苯醌中一侧无双键。 

本发明还保护了所述的化合物在制备细胞增殖抑制药物中的用途，及该化合物在制备抗肿瘤药物中的用途。 

本发明的显著优点：研究所示苯醌与苯环通过羰基和氧桥相连的螺环结构极为少见，所述苯醌螺环化合物具有显著的抗肿瘤活性，目前尚未见该化合物的化学结构及细胞增殖抑制活性的报道，因此市场上也尚未见有与此相关的药物。 

具体实施方式

在如下的实施例中所指的化合物的化学结构： 

    。

实施例1该化合物的发酵生产及分离精制 

1发酵生产

生产菌的发酵培养：按培养微生物的常规方法，取棘孢曲霉(Aspergillus aculeatus) IBPT-3 (已于2012年12月24日保藏在中国典型培养物保藏中心，地址：中国 武汉 武汉大学，保藏编号是：CCTCC NO：M 2012544) 适量，接种到PDA固体斜面培养基上在28℃培养箱中培养4天。

取斜面培养4天的棘孢曲霉(Aspergillus aculeatus) IBPT-3适量，接种到装有400mL培养液 [ 培养液组成(克/升)：甘露醇20.0，酵母膏3.0，麦芽糖20.0，味精10.0，葡萄糖10.0，KH₂PO₄ 0.5 ，MgSO₄ 0.3，NaCL 6.0 ，用水定容 ] 的1000mL锥形瓶中，28℃静止培养30天后，获得菌丝体和发酵液。 

2 浸膏的获得 

 用纱布将菌丝体和发酵液分离。将发酵液与乙酸乙酯1:2（v/v）萃取两次，萃取液减压蒸馏至干，得到发酵液的乙酸乙酯浸膏。

3 化合物的分离精制 

浸膏用100-200目硅胶拌样后，以石油醚：二氯甲烷：甲醇梯度组分为洗脱液，通过300-400目硅胶进行减压硅胶色谱柱层析，收集组分Fr.3 (二氯甲烷洗脱物)，Fr.3通过Sephadex LH-20凝胶柱层析，收集组分Fr.3.2（二氯甲烷/甲醇v/v=20:1的洗脱物），再以二氯甲烷-甲醇梯度组分为洗脱液，通过300-400目硅胶进行加压硅胶柱层析，收集组分Fr.3.2.2（二氯甲烷/甲醇v/v=50:1的洗脱物），最后通过半制备液相色谱(1010型ODS-A，10×250 mm，5μm)：分离流速为5 mL/min，流动相为40%乙腈含0.1% TFA，得到所示化合物（6.5 mg, t_R 13.4 min）。

化合物   无色油状物，负离子HR-ESI-MS m/z: 345.0981 [M - H]^-，计算值为 345.0974，分子式C₁₈H₁₈O₇; UV (MeOH)λ_max 292 nm; [α]²⁵_D +379.6° (c 0.15, MeOH); ¹H和¹³C-NMR等NMR数据见表1。