[发明专利]一种海洋芽孢杆菌及利用该菌生产过氧化氢酶的方法有效
申请号: | 201310022577.8 | 申请日: | 2013-01-21 |
公开(公告)号: | CN103060244A | 公开(公告)日: | 2013-04-24 |
发明(设计)人: | 霍颖异;许学伟;王春生;吴敏;张心齐;潘杰 | 申请(专利权)人: | 国家海洋局第二海洋研究所 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12N9/08;C12R1/01 |
代理公司: | 浙江杭州金通专利事务所有限公司 33100 | 代理人: | 徐飞虎;徐关寿 |
地址: | 310012 *** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 海洋 芽孢 杆菌 利用 生产 过氧化氢酶 方法 | ||
1.一种过氧化氢酶产酶菌,分类命名为伊平屋海岭海洋芽孢杆菌(Oceanobacillus iheyensis),保藏编号为CGMCC No.6042。
2.根据权利要求1所述的过氧化氢酶产酶菌,所述菌株具有以下特征:
(1)菌落形态:菌落呈圆形,表面光滑,边缘平整,微凸起,乳白色;
(2)细胞形态:革兰氏阳性菌,细胞显微镜下呈现运动性,形态为杆状;
(3)生理生化特征:好氧生长;氧化酶阳性;水解七叶苷、吐温40或吐温60,不水解吐温80、DNA或尿素;不产吲哚;能利用葡萄糖、甘露糖、果糖或麦芽糖产酸,不能利用阿拉伯糖或鼠李糖产酸;对阿莫西林、氨苄青霉素、氯霉素、红霉素、新生霉素或盘尼西林G敏感,对制霉素不敏感。
3.根据权利要求1所述的过氧化氢酶产酶菌,其特征在于:所述菌株的16SrRNA基因包含如Seq ID No.1所示的核苷酸序列。
4.一种利用权利要求1所述的菌株生产过氧化氢酶的方法,包括以下步骤:
(1)将菌株CGMCC No.6042接种至天然海水液体培养基,培养后加入过氧化氢刺激培养作为种子液;
(2)将种子液转接至发酵培养基中进行发酵培养,培养后加入过氧化氢刺激培养,即得到具有过氧化氢酶活性的发酵液。
5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于:所述方法步骤(1)中的天然海水培养基的配方为天然海水中加入0.1-0.5%的蛋白胨、0.01-0.05%的酵母提取物以及0.1-0.5%的酪蛋白氨基酸,调节pH为6.8-7.5。
6.根据权利要求4所述的方法,其特征在于:所述方法步骤(2)中的发酵培养基配方为天然海水中加入0.1-1%的酵母抽提物和0.5-5%的蛋白胨,pH为6.5-7.5。
7.根据权利要求4所述的方法,其特征在于:所述方法步骤(2)中细菌培养结束后加入1-10mM的过氧化氢刺激培养1-10小时。
8.根据权利要求4-7任一项所述的方法,其特征在于:所述方法步骤(2)获得发酵液中的过氧化氢酶活力为1000-10000U/mg。
9.根据权利要求4-7任一项所述的方法,其特征在于:根据需要,可任选对具有酶活力的发酵液进行处理,从中分离纯化出过氧化氢酶产物。
10.根据权利要求9所述的方法,其特征在于:所述处理方法的分离纯化条件为离子交换层析、反相层析、疏水层析、分子筛层析或其组合。
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