[发明专利]姜黄素在制备大电导钙激活钾通道开放剂中的用途

说明书

技术领域

本发明属中药领域，涉及中药姜黄主要活性成分姜黄素的新的药用用途，具体涉及姜黄素在制备钾通道开放剂中的用途，尤其是姜黄素作为大电导钙激活钾通道开放剂的新用途。 

背景技术

研究报道，大电导钙激活的钾通道（BK通道）广泛分布于各种类型的细胞中，尤其在平滑肌细胞、神经元和内分泌细胞等兴奋性细胞中表达丰富。BK通道受膜电位和细胞内Ca²⁺浓度双重调节，是细胞兴奋性，肌肉收缩和递质释放等多种生理过程的强大调节器。有研究显示，BK通道的激活、失活和变异与多种疾病调节有关，例如：作为血管平滑肌细胞膜上的优势离子通道，BK通道的激活和表达增加能够平衡高血压时冠脉张力的上升，增强平滑肌细胞舒张功能适应性；在固有免疫中，阻断BK通道使微生物杀伤和消化过程受到抑制；在若干种肿瘤的发生过程中，BK通道抑制肿瘤细胞增殖，影响其迁移，表现出抗肿瘤的特性，在神经系统中，激活的BK通道对神经细胞有保护作用。因此，BK通道是治疗高血压，脑中风，恶性肿瘤等许多疾病的潜在靶点。 

鉴于BK通道在人类生理、病理过程中的重要作用，寻找高活性、高选择性、类药性好的BK通道开放剂成为本领域研究的热点。但是，目前对BK通道开放剂的研究大多还停留在早期药物发现的阶段，仅有4个开放剂进入临床试验的开放剂，而其中3个（NS8，BMS204352和TA1702）都因故被中止，只有Andolast还在试验中。 

姜黄素是一种从草本植物姜黄中提取的天然植物酚类化合物。据文献报道，姜黄素是一个多靶点治疗药物，对若干疾病，如炎症性疾病，阿尔兹海默症、心血管疾病、肿瘤等有治疗作用。现代药理研究表明，姜黄素主要通过抗炎、抗氧化、抑制多种酶类等药理活性发挥作用。 

目前，尚未见关于姜黄素具有调节BK通道活性的作用的报道。 

发明内容

本发明的目的是提供姜黄素新的药用用途，涉及姜黄素在制备钾通道（BK通道） 开放剂中的用途，尤其涉及姜黄素在制备大电导钙激活钾通道开放剂中的用途。 

本发明通过细胞实验，证实了姜黄素能够显著增加BK通道的电流，增加BK通道的蛋白表达，以及进一步产生的开放BK通道的用途。 

本发明所述的姜黄素是一种从草本植物姜黄中提取的天然植物酚类化合物，可以按常规方法通过中药姜黄进行人工提取，或通过市购的渠道获得。 

本发明以携带BK通道基因的pCMV-myc质粒转染HEK293细胞，使BK通道在HEK293细胞中过表达；采用全细胞膜片钳的方法研究姜黄素对BK通道电生理活性的影响；用蛋白质免疫印迹实验（Western Blot）和细胞表面生物素化方法检测BK通道总蛋白和细胞膜表面蛋白的表达水平，通过Cycloheximide-based protein chase实验研究姜黄素对BK通道蛋白降解过程的作用。经细胞生物学实验结果证明，姜黄素具有以下开放BK通道的作用： 

1、增加瞬时转染BK通道基因的HEK293细胞中BK通道总蛋白的表达。 

2、增大BK通道电流。 

3、增加BK通道蛋白的表面表达。 

4、抑制BK通道蛋白降解途径，从而稳定BK通道蛋白。 

本发明经细胞实验结果证明，姜黄素具有开放大电导钙激活钾通道的作用，包括对该通道电流的增大作用；对该通道蛋白的总表达和表面表达的增加作用；抑制该通道蛋白的降解途径，增强其稳定性。 

本发明所述的姜黄素进一步可制备新的大电导钙激活钾通道开放剂药物，用以治疗平滑肌功能紊乱相关疾病的药物，包括治疗膀胱过度活动症、胃蠕动过强等平滑肌功能紊乱相关疾病。 

本发明为姜黄素抗肿瘤，神经保护等的多种药理作用的机制提供了理论依据；有助于确证BK作为药物靶标；也为进一步将姜黄素作为大电导钙激活钾通道开放剂制备治疗膀胱过度活动症，胃蠕动过强等平滑肌功能紊乱相关疾病的药物奠定了实验基础。 

为了便于理解，以下将通过具体的附图和实施例对本发明的姜黄素作为大电导钙激活钾通道开放剂的新用途进行详细地描述。需要特别指出的是，具体实例和附图仅是为了说明，显然本领域的普通技术人员可以根据本文说明，在本发明的范围内对本发明做出各种各样的修正和改变，这些修正和改变也纳入本发明的范围内。 

附图说明

图1是Western Blot方法证实瞬时转染pCMV-myc-BK质粒后BK通道蛋白的过表达图。 

图2是姜黄素对BK通道总蛋白的增加作用， 

其中，*：与空白对照相比，P＜0.05。