[发明专利]试管慈姑组织培养快速繁殖的方法无效
申请号: | 201310024276.9 | 申请日: | 2013-01-22 |
公开(公告)号: | CN103070073A | 公开(公告)日: | 2013-05-01 |
发明(设计)人: | 朱红莲;柯卫东;刘玉平;彭静;黄新芳;刘义满;李峰;李双梅;黄来春;叶元英 | 申请(专利权)人: | 武汉市蔬菜科学研究所 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 武汉开元知识产权代理有限公司 42104 | 代理人: | 马辉 |
地址: | 430065 湖北*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 试管 慈姑 组织培养 快速 繁殖 方法 | ||
1.一种试管慈姑组织培养快速繁殖的方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)外植体的消毒处理:选取无病虫危害的慈姑球茎,清洗干净后,切取球茎顶芽为外植体,流水冲洗20~35min,滤干后剥去最外面1~2层鳞片进行消毒处理,先用质量分数为72%硫酸链霉素处理10~30min,再用质量分数为70%乙醇表面消毒20~40s,最后用质量分数为0.1%HgCl2溶液处理2~5min;
2)茎尖分化:消毒处理后的慈姑用无菌水冲洗4~5次,剥去2~3层鳞片,切取茎尖接种于启动培养基上,所述启动培养基为1/2MS培养基、添加6-苄氨基嘌呤1.0~2.0mg/L、萘乙酸0.1~0.5mg/L、质量分数为3.0%的蔗糖和质量分数为0~0.5%的琼脂,pH值为5.8~6.0,培养温度25℃~28℃,光照强度1000~1500 lx,每天光照时间10h,直至长成再生小植株;
3)继代增殖:将茎尖诱导的再生小植株转接到增殖培养基中进行继代增殖培养,所述增殖培养基为MS培养基、添加6-苄氨基嘌呤1.0~3.0 mg/L、萘乙酸0.1~0.3mg/L、质量分数为3.0%的蔗糖和质量分数为0~0.5%的琼脂,pH值为5.8~6.0,培养温度25℃~28℃,光照强度1000~1500 lx,每天光照时间10h,直至萌发形成分株的慈姑试管苗;
4)诱导试管慈姑:将慈姑试管苗转接到诱导培养基上,所述诱导培养基为MS培养基、添加6-苄氨基嘌呤0~3.0mg/L、萘乙酸0~0.3mg/L、活性炭0.5~1.0g/L、质量分数为3.0%~8.0%的蔗糖和质量分数为0~0.5%的琼脂,pH值为5.8~6.0,在培养温度14℃~22℃,每天光照时间0~12h的条件下诱导形成试管慈姑。
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