[发明专利]一种快速检测瘦肉精无标记免疫传感器的制备方法和应用有效
申请号: | 201310026155.8 | 申请日: | 2013-01-21 |
公开(公告)号: | CN103063833A | 公开(公告)日: | 2013-04-24 |
发明(设计)人: | 张勇;魏琴;吴丹;李贺;杜斌;王志玲;马洪敏;庞雪辉;李慧芝;罗川南;范大伟;其他发明人请求不公开姓名 | 申请(专利权)人: | 济南大学 |
主分类号: | G01N33/551 | 分类号: | G01N33/551;G01N27/327 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 250022 *** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 快速 检测 瘦肉精 标记 免疫 传感器 制备 方法 应用 | ||
1.一种快速检测瘦肉精无标记免疫传感器的制备方法,其特征在于,制备步骤为:以玻碳电极为工作电极,在电极表面修饰Au-Ag2S核壳纳米复合材料-壳聚糖溶液,再以瘦肉精抗体溶液进行修饰,最后滴涂牛血清白蛋白溶液,封闭电极表面非特异性活性位点。
2.如权利要求1所述的一种快速检测瘦肉精无标记免疫传感器的制备方法,其特征在于,所述Au-Ag2S核壳纳米复合材料-壳聚糖溶液,Au-Ag2S核壳纳米复合材料与壳聚糖的质量比为1 : 4 ~ 9。
3.如权利要求1所述的一种快速检测瘦肉精无标记免疫传感器的制备方法,其特征在于所述Au-Ag2S核壳纳米复合材料,Au和Ag2S的质量比为3.4 ~ 8.0 : 1,其制备步骤为:将Au-Ag纳米粒子离心后,重新分散在0.1 mol·L-1的CTAB中,加入100 mL硫前驱体溶液,震荡1 ~ 3 min后,静置1 ~ 2 h,离心分离后,去除上清液,在50 ℃下真空干燥,制得Au-Ag2S核壳纳米复合材料。
4.如权利要求1所述的一种快速检测瘦肉精无标记免疫传感器的制备方法,其特征在于,所述的免疫传感器应用于瘦肉精的检测,其检测步骤为:
(1)标准溶液配制:配制一组包括空白标样在内的不同浓度的瘦肉精标准溶液,底液为pH 7.4的磷酸盐缓冲溶液;
(2)工作电极修饰:将本发明所述的快速检测瘦肉精的无标记免疫传感器作为工作电极,将步骤(1)中配制的不同浓度的瘦肉精标准溶液分别滴涂到工作电极表面,4 ℃ 冰箱中保存;
(3)工作曲线绘制:将饱和甘汞电极作为参比电极,铂丝电极作为辅助电极,与步骤(2)所修饰好的工作电极组成三电极系统,连接电化学工作站,在K3[Fe(CN)6]溶液中,用方波伏安法(SWV)在–0.6 ~ 0.2 V电压范围内进行检测,空白标样的响应电流记为I0,含有不同浓度的瘦肉精标准溶液的响应电流记作Ii,响应电流降低的差值为ΔI = I0-Ii,ΔI与瘦肉精标准溶液的质量浓度C之间成线性关系,绘制ΔI-C工作曲线;
(4)瘦肉精的检测:用待测样品代替步骤(1)中的瘦肉精标准溶液,按照步骤(2)和(3)中的方法进行检测,根据响应电流降低的差值ΔI和工作曲线,得到待测样品中瘦肉精的含量。
5.如权利要求1所述的一种快速检测瘦肉精无标记免疫传感器的制备方法,其特征在于所述瘦肉精选自下列之一:莱克多巴胺、克伦特罗、沙丁胺醇、硫酸沙丁胺醇、盐酸多巴胺、西马特罗、硫酸特布他林、苯乙醇胺A、班布特罗、盐酸齐帕特罗、盐酸氯丙那林、马布特罗、西布特罗、溴布特罗、酒石酸阿福特罗、富马酸福莫特罗。
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