[发明专利]一种HIP-55的新用途

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种HIP-55的新用途。

背景技术

HIP-55(hematopoietic progenitor kinase 1[HPK1]-interacting protein of55kDa；也称为drebrin-like protein、mAbp1或SH3P7)是一个包含多功能域的蛋白质。其结构主要包含着N端的F-actin蛋白结合结构域和C端SH3结构域。HIP-55参与突触发生、受体内吞、骨架重排及信号转导。目前对HIP-55功能了解较少尚无对HIP-55在心血管系统方面的研究报道。

心血管疾病是中国居民健康的“头号杀手”，每年主要用于心血管病的直接医疗费用已达1300亿元人民币。心肌纤维化是心脏重塑的重要病理改变，是指在心肌的正常组织结构中心肌成纤维细胞过度分裂，胶原纤维过量积聚、心脏组织中胶原浓度显著升高或胶原成分发生改变，引起心肌僵硬度增加、舒缩功能受限，严重影响心脏的功能。这种病理变化在多种心血管疾病中存在，与心律失常、心功能障碍甚至心脏性猝死密切相关。心肌纤维化是心功能由代偿期向失代偿期转变的关键，其严重程度和疾病的发生发展及预后密切相关。因此，预防和逆转心肌纤维化具有重要的意义。大量研究表明儿茶酚胺-肾上腺素系统过度激活是促心肌纤维化的重要因素，儿茶酚胺（如异丙肾上腺素isoproteronol,Iso)通过β-ARs促进心肌成纤维细胞增殖和胶原合成增加，从而导致心肌纤维化、心脏功能的恶化和心衰的形成。同时β-ARs阻滞剂能够显著改善患者的预后。

发明内容

本发明的目的是提供HIP-55蛋白、HIP-55蛋白编码基因或含有HIP-55蛋白编码基因的重组载体或含有HIP-55蛋白编码基因的腺病毒的新用途。

本发明提供的HIP-55蛋白、HIP-55蛋白编码基因或含有HIP-55蛋白编码基因的重组载体或含有HIP-55蛋白编码基因的腺病毒在制备具有如下1）或2）功能的产品中的应用：

1）抑制心脏成纤维细胞增殖；

2）抑制P38MAPK激酶活性；

所述HIP-55蛋白的氨基酸序列为序列表中的序列2。

上述抑制心脏成纤维细胞增殖和所述抑制P38MAPK激酶活性均在（异丙肾上腺素）ISO诱导下进行。

上述抑制心脏成纤维细胞增殖是在ISO诱导下进行；所述抑制心脏成纤维细胞增殖具体通过如下1）或2）体现：

1）在ISO诱导下减少心脏成纤维细胞Brdu参入量；

2）在ISO诱导下减少心脏成纤维细胞CCK8吸光值。

上述抑制P38MAPK激酶活性是在ISO诱导下进行；抑制P38MAPK激酶活性通过降低P38MAPK激酶底物ATF-2的磷酸化水平体现。

上述应用中，所述HIP-55蛋白编码基因的核苷酸序列为序列表中的序列1。

上述应用中，所述含有HIP-55蛋白编码基因的重组载体为重组腺病毒载体；

在本发明的实施例中，上述重组腺病毒载体为将HIP-55蛋白编码基因与Flag-IRES/DesRedE2融合成为HIP-55-Flag-IRES/DesRedE2基因后插入pAd/CMV/V5-DEST中，得到的重组腺病毒载体pAd-HIP-55-Flag-IRES/DesRedE2。

所述含有HIP-55蛋白编码基因的腺病毒为将所述含有HIP-55蛋白编码基因的重组载体转染细胞，包装得到的腺病毒。

上述应用中，所述产品为药物。

上述应用中，所述心脏成纤维细胞为离体心脏成纤维细胞。

上述应用中，所述抑制心脏成纤维细胞增殖是通过抑制P38MAPK激酶活性实现。

本发明的实验证明，本发明发现经异丙肾上腺素（ISO）诱导，在乳大鼠心肌成纤维细胞中过表达HIP-55明显抑制心脏成纤维细胞增殖，与之相反，应用RNAi方法knock down HIP-55明显促进心脏成纤维细胞增殖；在过表达HIP-55心脏成纤维细胞中能够抑制ISO诱导的P38MAPK的激活以及激酶活性，而在Knock-down HIP-55心肌成纤维细胞中能够增强ISO诱导的P38MAPK的激活以及激酶活性；发现HIP-55是一种新的对心脏纤维化具有保护作用的蛋白质，为临床诊断、治疗及新药开发提供了新的靶点。

附图说明

图1为过表达HIP-55蛋白质表达水平的检测