[发明专利]高水平人二倍体细胞培养水痘-带状疱疹疫苗病毒方法有效
申请号: | 201310031329.X | 申请日: | 2013-01-28 |
公开(公告)号: | CN103074304B | 公开(公告)日: | 2016-01-13 |
发明(设计)人: | 莫呈钧 | 申请(专利权)人: | 江苏健安生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N7/00 | 分类号: | C12N7/00;C12R1/93 |
代理公司: | 南通市永通专利事务所 32100 | 代理人: | 葛雷 |
地址: | 226000 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 水平 二倍体 细胞培养 水痘 带状疱疹 疫苗 病毒 方法 | ||
1.一种高水平人二倍体细胞培养水痘-带状疱疹疫苗病毒方法, 其特征是:包括下列步骤:
(1)建立主体细胞库:按照美国FDA标准,取ATCCCCL171 细胞株,起始为第17代,经过20天左右共3-5次传代培养,收获的 细胞用冷冻管在液氮保存;
(2)工作细胞库细胞培养:将步骤(1)得到的细胞再经过12-15 天共3-5次传代培养,按照准备临床实验材料要求进行和实验数据记 录,液氮和深冻保存;
(3)为保证疫苗病毒的高滴度,同时进行二倍体细胞群体倍增 水平同步监测,选用二倍体细胞群体倍增水平2.5以上的细胞株生产 疫苗。
2.根据权利要求1所述的高水平人二倍体细胞培养水痘-带状疱 疹疫苗病毒方法,其特征是:上述步骤中的传代培养采用下列二倍体 细胞培养液:采用MEM细胞培养基,加有相当于二倍体细胞培养液 体积8-15%的小牛血清,每升二倍体细胞培养液中含有1-5mM的L- 谷氨酰胺,每毫升二倍体细胞培养液中含100-200单位青霉素、 50-100微克链霉素及20-40纳克两性霉素,二倍体细胞培养液中含 有12种非必需氨基酸;12种非必需氨基酸采用GIBCOBRL生产的 100倍浓缩液,且在每升二倍体细胞培养液中的加入量为10ml。
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