[发明专利]高水平人二倍体细胞培养水痘-带状疱疹疫苗病毒方法有效

专利信息
申请号: 201310031329.X 申请日: 2013-01-28
公开(公告)号: CN103074304B 公开(公告)日: 2016-01-13
发明(设计)人: 莫呈钧 申请(专利权)人: 江苏健安生物科技有限公司
主分类号: C12N7/00 分类号: C12N7/00;C12R1/93
代理公司: 南通市永通专利事务所 32100 代理人: 葛雷
地址: 226000 江苏*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 水平 二倍体 细胞培养 水痘 带状疱疹 疫苗 病毒 方法
【权利要求书】:

1.一种高水平人二倍体细胞培养水痘-带状疱疹疫苗病毒方法, 其特征是:包括下列步骤:

(1)建立主体细胞库:按照美国FDA标准,取ATCCCCL171 细胞株,起始为第17代,经过20天左右共3-5次传代培养,收获的 细胞用冷冻管在液氮保存;

(2)工作细胞库细胞培养:将步骤(1)得到的细胞再经过12-15 天共3-5次传代培养,按照准备临床实验材料要求进行和实验数据记 录,液氮和深冻保存;

(3)为保证疫苗病毒的高滴度,同时进行二倍体细胞群体倍增 水平同步监测,选用二倍体细胞群体倍增水平2.5以上的细胞株生产 疫苗。

2.根据权利要求1所述的高水平人二倍体细胞培养水痘-带状疱 疹疫苗病毒方法,其特征是:上述步骤中的传代培养采用下列二倍体 细胞培养液:采用MEM细胞培养基,加有相当于二倍体细胞培养液 体积8-15%的小牛血清,每升二倍体细胞培养液中含有1-5mM的L- 谷氨酰胺,每毫升二倍体细胞培养液中含100-200单位青霉素、 50-100微克链霉素及20-40纳克两性霉素,二倍体细胞培养液中含 有12种非必需氨基酸;12种非必需氨基酸采用GIBCOBRL生产的 100倍浓缩液,且在每升二倍体细胞培养液中的加入量为10ml。

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