[发明专利]一株柴油降解酵母菌及其应用

说明书

（一）技术领域

本发明涉及一株柴油降解酵母菌株——解脂耶罗维亚酵母（Yarrowialipolytica）KML，及其在降解柴油中的应用。

（二）背景技术

石油是目前环境中广泛存在的污染物之一，包括汽油、煤油、柴油、润滑油、石蜡和沥青等，是多种烃类（正烷烃、支链烷烃、环烷烃、芳烃）和少量其他有机物。随着经济的发展，人类对能源的需求不断扩大，石油已成为人类最主要的能源之一。随着石油产量和需求的不断提高，冶炼、储存、运输等环节泄漏所造成的水体、土壤和大气等环境污染相应突出。石油进入土壤后与土粒粘连，土壤结构被破坏，降低土壤的透气性和渗水性。

目前，国内外石油污染土壤修复技术按其性质可分为3种：物理方法、化学方法和生物方法。石油污染的生物修复，是指利用处理系统中生物（主要是微生物）的代谢活动来减少污染现场污染物的浓度或使其无害化的过程，其最终产物是CO₂、H₂O等物质。与物理、化学修复技术相比，具有多种优点：成本低；对人和环境造成的影响小；污染物氧化完全。微生物的生物降解效果受许多因素的影响，如温度，pH值，营养物，氧，培养基组成，污染物的浓度和生物利用度等。关于石油类降解微生物已有一些报道，但符合实际应用要求的菌株还有待不断的开发和研究。为研究适合非洲本土环境的石油类降解微生物，本发明从来自喀麦隆未受柴油污染土壤中，筛选分离出高效柴油降解酵母，分析了影响其降解能力的几种因素，为进一步应用打下基础。

（三）发明内容

本发明目的是提供一株高效柴油降解酵母——解脂耶罗维亚酵母（Yarrowia lipolytica）KML及其应用。

本发明采用的技术方案是：

一株柴油降解酵母菌株——解脂耶罗维亚酵母（Yarrowia lipolytica）KML，保藏于中国典型培养物保藏中心，地址：中国，武汉，武汉大学，保藏日期为2013年1月10日，保藏编号为CCTCC No：M2013011。

该菌株从喀麦隆未被柴油污染的土壤样品中分离获得，经形态和生理生化特征鉴定及5.8S rDNA-ITS序列分析，该酵母菌株属于解脂耶罗维亚酵母（Yarrowia lipolytica）。GC-MS分析可知，该菌种对柴油有很好的降解能力。

本发明还涉及所述的解脂耶罗维亚酵母KML在降解柴油中的应用。

优选的，所述降解在20~37℃、pH6.0~10.0条件下进行。

更为优选的，所述降解在30℃、pH9.0条件下进行。

具体的，所述降解可在无机盐培养基中进行，添加适量营养物和表面活性剂可以促进生物降解，优选在无机盐培养基中添加1g/L酵母膏和10g/L鼠李糖脂。

本发明的有益效果主要体现在：本发明提供了一株可高效降解柴油的酵母菌，为柴油的生物降解提供了基础。

（四）附图说明

图1为基于5.8S rDNA-ITS构建的系统进化树；

图2为初始pH（A）和培养温度（B）对柴油降解率的影响；

图3为氮源（A）和鼠李糖脂（B）对降解率的影响；

图4为柴油组分及其降解产物气相色谱-质谱图；A、对照；B、培养5天；

C、培养9天。

（五）具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明进行进一步描述，但本发明的保护范围并不仅限于此：

实施例1：柴油降解菌株的筛选与鉴定

材料与方法:

1.菌株的来源

降解柴油的菌株从来自喀麦隆的土壤中分离得到。

2.培养基的配制