[发明专利]烟草中核黄素的定量检测方法

权利要求书

1.一种烟草中核黄素的定量检测方法，其特征在于，是采用液相色谱-电喷雾线性离子阱多级质谱法，包括以下步骤：

S1.样品液准备；

称取0.25 g 烟末，加入25 mL 0.1 mol/L 盐酸后在95℃水浴中摇荡1小时，冷却后加入20 mL 2 mol/L醋酸铵，用水定容至50 mL即得待测烟草样品溶液，以待测烟草样品溶液制备不同浓度梯度的进样液； 

配制核黄素的甲醇溶液作为储备液；配制核黄素的水溶液作为工作标准溶液，核黄素的浓度为4μg核黄素/mL水；

S2.将进样液经0.2 μm滤膜过滤后直接进样，采用液相色谱-电喷雾线性离子阱质谱法进行分析检测；

所述液相色谱的条件为：

安捷伦Eclipse XDB-C₁₈色谱柱，所述色谱柱的规格为150 mm ×2.1 mm、5 μm；流动相为含0.1%甲酸的甲醇溶液与0.05%醋酸的混合液，所述甲醇溶液和醋酸的体积比为70%: 30%；使用安捷伦Zorbax C₁₈保护柱，所述保护柱的规格为12.5 mm × 2.1 mm、5 μm，等梯度淋洗，流速200μL/min，柱温30℃，进样环5μL，全环进样；

所述电喷雾线性离子阱质谱的条件为：

毛细管温度：350℃；喷雾电压：5 kV；鞘气：31 LTQ单位；辅助气：5 LTQ单位；最大离子注射时间300 ms；分离宽度 2 m/z；SRM模式，其中归一化碰撞能量：22%，激活Q：0.30。

2.根据权利要求1所述烟草中核黄素的分析鉴定方法，其特征在于，S1所述储备液避光保存在2℃下。

3.根据权利要求1所述烟草中核黄素的分析鉴定方法，其特征在于，S1所述工作标准溶液用完立即避光保存于2℃下，每两天配制一次。

4.根据权利要求1所述烟草中核黄素的液相色谱-电喷雾线性离子阱多级质谱法定量检测方法，其特征在于，S1所述以待测烟草样品溶液制备不同浓度梯度的进样液浓度为80ng/mL、320ng/mL、960ng/mL、2000ng/mL、4000ng/mL。