[发明专利]一种含羟基酪醇的橄榄叶提取物微乳的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，尤其是涉及一种富含羟基酪醇的橄榄叶提取物微乳制备及其应用。

背景技术

如何有效地防止油脂氧化、变质，是一个世界性的难题。油脂受氧气、水、光、热、微生物等因素的作用，会逐渐氧化或水解而变质酸败。其中性脂肪会分解为甘油和脂肪酸，或脂肪酸中的不饱和链断开形成过氧化物，再依次分解为低级脂肪酸、醛类、酮类等物质，从而产生异臭、异味。油脂的酸败变质，不但影响其风味、品质和营养价值，还会导致细胞膜、组织、酶和基因的受损，危害人体健康。在我国每年都有多起因误食了酸败的油脂或含油脂食品发生急性食物中毒的事件。人们食用变质的食用油脂，极易发生疾病，加速衰老，更重要的是，有的酸败产物还具有致癌作用。

在油脂中添加抗氧化剂，对于保证油脂及含油脂食品的质量，延长储存期具有非常重要的意义。目前，应用在油脂中的抗氧化物质主要是一些合成来源的抗氧化剂，如叔丁基对苯二酚(TBHQ)、二丁基羟基甲苯(BHT)、丁基羟基茴香醚(BHA)等。这些物质性质稳定、成本低廉，但是具有毒副作用，甚至有潜在的积累致癌作用。随着社会经济的急速发展，人们健康意识的不断提高，合成的抗氧化剂的安全性越来越引起人们的质疑。部分发达国家早已限量或禁用对人体有毒副作用的人工合成抗氧化剂，如北欧已禁止使用BHA、BHT。研发高效、无毒的天然来源抗氧化剂已经成为的行业研究焦点。

   现有的研究表明，多个天然产物活性物质添加在油脂类物质中具有良好的抗氧化特性，如迷迭香精油、山捻子多酚等。但是绝大多数的天然成分物质组分本身也易受外界因素，如光、热等的影响，影响其稳定的使用。另外，在水/油介质中溶解性也不理想，制约了其的广泛应用。因此引入微乳（微胶囊）化等先进技术将活性组份进行有效包埋，提高生活活性，提高与其它基质的相容性，从而扩大其应用范围。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是一种含羟基酪醇的橄榄叶提取物微乳的制备方法，包括以下几个步骤：

步骤A：采用加热循环提取。将油橄榄干叶与水、乙醇按质量比9︰1-1︰9的比例投料，温度控制在60-90℃，提取时间2个小时；

步骤B: 采用醇提水沉的方法预处理。提取液回收溶剂后，水沉，压滤，合并滤液；

步骤C：采用大孔树脂分离纯化方法纯化，滤过液经大孔树脂吸附，大孔树脂采用D101型，安徽三星树脂科技有限公司生产，平均孔径9-10 nm，用质量比为9︰1-1︰9的乙醇/水混合溶剂解吸附，收集解吸液；

步骤D：酸解/水解上述解吸液，得到含羟基酪醇的橄榄叶提取物。

优选的微乳制备方法，包括以下几个步骤：

将羟基酪醇橄榄叶提取物溶解在水中，添加极少量的表面活性剂后均质成悬浮液得到羟基酪醇乳液，压力3000Psi，均质时间5分钟。再通过高度剪切微射流的工艺处理，机器型号M-110S（美国Microfluidics International Corporation制造），压力设定为20000Psi，循环时间5-8分钟，制成纳米乳，并用微孔滤膜过滤除菌。还可将纳米乳冷冻干燥或喷雾干燥成微囊粉末。

其中，羟基酪醇（hydroxytyrosol，以下简称HT）化学名为3,4-二羟基苯乙醇，是一种来源于油橄榄植物的天然多酚类化合物。分子式为C₈H₁₀O₃，分子量154.1632，闪点15°C。粉末易吸湿。国内外研究者已经证实，羟基酪醇是一种安全有效的抗氧化生物活性物质。橄榄油系列产品良好的抗氧化生物活性、抗肿瘤活性、抗衰老活性等主要来源于以本化合物为主的系列多酚。

结构式为：

目前羟基酪醇主要的应用有：1.能有效增强皮肤弹性和润泽，具除皱、抗衰老之功效； 2.有助于人体对矿物质的吸收，保持骨密度，减少骨骼疏松；3.对人体视力的保护作用，防治因吸烟导致的多种视网膜退化等病变；4.改善血管弹性，用于动脉硬化、高血压等的预防与治疗； 5.可以促进肺癌、乳腺癌等癌症后期恢复和提高化疗效果；6.还可作为天然的抗菌、抗病毒和杀真菌产品用于农业和虫害控制用途。