[发明专利]一种用于籼粳亚种广亲和育性位点片段聚合的分子标记引物组合及其应用有效
申请号: | 201310037291.7 | 申请日: | 2013-01-30 |
公开(公告)号: | CN103103279A | 公开(公告)日: | 2013-05-15 |
发明(设计)人: | 万建民;赵志刚;江玲;王益华;刘裕强;陈亮明;刘世家;刘喜;陈赛华;张文伟 | 申请(专利权)人: | 南京农业大学 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12N15/11 |
代理公司: | 南京天华专利代理有限责任公司 32218 | 代理人: | 徐冬涛;傅婷婷 |
地址: | 210095 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 籼粳亚种广 亲和 育性位点 片段 聚合 分子 标记 引物 组合 及其 应用 | ||
1.籼粳亚种广亲和育性位点片段聚合的分子标记方法,其特征在于,用分子标记引物W5、W7和W17分别对育性位点S5-n位点、S7-n位点和S17-n位点的广亲和育性片段通过分子标记选择来聚合,其中
用分子标记引物W5:左端引物序列SEQ ID NO.1,右端引物序列SEQ IDNO.2扩增广亲和水稻品种DNA,获得S5-n位点标记片段大小为105bp;扩增籼稻品种DNA,获得S5-i位点标记片段大小为145bp;扩增粳稻品种DNA,获得S5-位点标记片段大小为13;
用分子标记引物W7:左引物序列SEQ ID NO.3,右引物序列SEQ IDNO.4扩增广亲和品种DNA,获得S7-n位点标记片段有2条带,大小分别为140bp和175bp;籼稻品种DNA,获得S7-i位点标记片段大小为150bp;扩增粳稻品种DNA,获得S7-j位点标记片段有2条带,大小分别为140bp和150bp;
用分子标记引物W17:左端引物序列SEQ ID NO.5,右端引物序列SEQ IDNO.6扩增广亲和品种DNA,获得S17-n位点标记片段大小为200bp;扩增籼稻品种DNA,获得S17-i位点标记片段大小为180bp;扩增粳稻品种DNA,获得S17-j位点标记片段有2条带,大小分别为180bp和190bp。
2.一种用于籼粳亚种广亲和育性位点片段聚合的分子标记引物组合,其特征在于由分子标记引物W5、W7和W17组成,其中,分子标记引物W5、W7和W17分别对育性位点S5位点、S7位点和S17位点,分子标记引物W5的左端引物序列为SEQ ID NO.1,右端引物序列为SEQ ID NO.2;分子标记引物W7的左端引物序列为SEQ ID NO.3,右端引物序列为SEQ ID NO.4;分子标记引物W17的左端引物序列为SEQ ID NO.5,右端引物序列为SEQ ID NO.6。
3.权利要求2所述的分子标记引物组合在杂交育种中的应用。
4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于权利要求2所述的分子标记引物组合在聚合多个广亲和基因的水稻品种的选育中的应用。
5.根据权利要求4所述的应用,其特征在于包含如下步骤:
权利要求1所述分子标记方法的应用,包括:
(1)以高产籼稻恢复系镇恢129为母本,和高抗白叶枯病的抗63杂交得F1种子,冬季把F1种子带海南加代,再与带有粳稻广亲和品种02428血缘的R437复交,在分离三交群体中,分别用S5位点的标记W5;S7位点的标记W7;S17位点的标记W17进行检测;在分离群体中只要带有这3个位点的片段,同时包含杂合片段,都在当季收种;在随后的每一个世代中,都用同样的方法进行检测,一直到复交CF8世代得到一个基本稳定的籼稻恢复系材料W8733,即镇恢129/抗63//R437;
(2)以籼稻恢复系材料W8733作育种材料进一步自交,发现株系W107表现稳定整齐一致,株型好,同时用权利要求2所述的分子标记引物组合对3个广亲和位点:S5-n位点、S7-n位点和S17-n位点进行检测,结果表明W107都带有S5-n位点、S7-n位点和S17-n位点的片段,将该株系暂定名为恢复系W107。
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