[发明专利]一种siRNA表达载体及其应用有效
| 申请号： | 201310038942.4 | 申请日： | 2013-01-31 |
| 公开（公告）号： | CN103205461A | 公开（公告）日： | 2013-07-17 |
| 发明（设计）人： | 姚远颋;王海峰;费倩岚;谈竹君;劳昕元 | 申请（专利权）人： | 上海黄离生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85;A61K48/00 |
| 代理公司： | 上海智信专利代理有限公司 31002 | 代理人： | 朱水平;沈利 |
| 地址： | 200233 上海市*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 sirna 表达 载体 及其 应用 | ||
1.一种用于构建siRNA表达载体的空载体，其特征在于，其序列从5’到3’依次包括以下序列：
1）来源于CMV RNA聚合酶II依赖型启动子序列；
2）pri-MiR21前部片段序列，其序列如序列表中SEQ ID NO.1所示；
3）限制性内切酶酶切位点序列；
4）pri-MiR21后部片段序列，其序列如序列表中SEQ ID NO.2所示；和
5）终止子序列。
2.如权利要求1所述的空载体，其特征在于，所述的限制性内切酶酶切位点是Bsm BI酶切位点。
3.如权利要求1所述的空载体，其特征在于，所述的终止子序列是来源于SV40PolyA的序列。
4.如权利要求1所述的空载体，其特征在于，所述空载体的骨架是pCDH质粒。
5.一种表达siRNA的重组载体，其序列中包括以下序列，其特征在于，其序列从5’到3’依次包括以下序列：
1）来源于CMV RNA聚合酶II依赖型启动子序列；
2）pri-MiR21前部片段序列，其序列如序列表中SEQ ID NO.1所示；
3）siRNA正义序列-MiR21环结构序列-siRNA反义序列；
4）pri-MiR21后部片段序列，其序列如序列表中SEQ ID NO.2所示；和
5）终止子序列。
6.如权利要求5所述的重组载体，其特征在于，所述的MiR21环结构序列如序列表中SEQ ID NO.5所示。
7.如权利要求5所述的重组载体，其特征在于，所述的限制性内切酶酶切位点是Bsm BI酶切位点。
8.如权利要求5所述的重组载体，其特征在于，所述的终止子序列是来源于SV40PolyA的序列。
9.如权利要求5所述的重组载体，其特征在于，所述空载体的骨架是pCDH质粒。
10.如权利要求5-9任一项所述的表达siRNA的重组载体在基因沉默中的用途。
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