[发明专利]一种肾康注射液的指纹图谱的鉴别方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种肾康注射液指纹图谱的鉴别方法，具体地说是用高效液相色谱指纹图谱法来对肾康注射液中有效成分进行质量控制的一种鉴别方法。

背景技术

慢性肾功能不全是由各种原因造成的慢性进行性肾实质损害的一组临床综合征，随着疾病的进展最终发展为尿毒症，目前慢性肾功能不全尚缺乏有效的治疗方案。肾康注射液由大黄、丹参、黄芪、红花四味药物制成的中药复方静脉注射液, 具有降逆泄浊，益气活血之功，用于治疗慢性肾衰。临床资料显示，肾康注射液可以改善肾功能，延缓慢性肾功能不全的进展。

肾康注射液由大黄、丹参、黄芪、红花四味药材制成，四味药材均为《中华人民共和国药典2010版》一部收载品种。大黄为蓼科植物掌叶大黄Rheum palmatum, L．、唐古特大黄Rheum tanguticum／ Maxim. ex Balf.或药用大黄Rheumoj-flcinaleBaill.的干燥根和根茎。大黄中的主要成分是蒽醌苷及双蒽酮苷，其醌苷有：大黄酚-1-葡萄糖苷或大黄酚苷、大黄素-6-葡萄糖苷、芦荟大黄素-8-葡萄糖苷、大黄素甲醚葡萄糖苷、大黄酸-8-葡萄糖苷；掌叶大黄中还含有大黄素双葡萄糖苷、芦荟大黄素双葡萄糖苷、大黄酚双葡萄糖苷。双蒽酮苷有番泻苷A、B、C、D、E、F。游离型蒽醌类主要有：大黄酚、大黄素、大黄素甲醚、芦荟大黄素、大黄酸。大黄又含有大黄鞣酸及其相关物质, 如没食子酸、儿茶素、大黄四聚素。此外，大黄尚含有脂肪酸、草酸钙、葡萄糖、果糖和淀粉。目前大黄药材的质量控制方法主要有：以芦荟大黄素(C₁₅H₁₀O5)、大黄酸(C₁₅H₈0₆)、大黄素(C₁₅H₁₀0₅)、大黄酚(C₁₀H₁₀0₄)和大黄素甲醚(C₁₆H₁₂0₅)的总量测定作为含量测定方法《中华人民共和国药典2010版一部》；道地产区大黄药材HPLC_DAD_MS指纹特征研究（张依倩等，《2010年中国药学大会暨第十届中国药师周论文集》）；中药大黄UPLC-MS指纹图谱的研究（王国英等，《西北地区第六届色谱学术报告会甘肃省第十一届色谱年会论文集》）；Determination of 19 rhubarb constituents by high-performance liquid chromatography-ultraviolet-mass spectrometry（J. Sep. Sci. 2006, 29, 2584-2593）。丹参为唇形科植物丹参Salvia miltiorrhizaBge.的干燥根和根茎。丹参主要含结晶性菲醌类化合物：丹参酮I、IIA、IIB，异丹参酮I、异丹参酮II，隐丹参酮，异隐丹参酮、羟基丹参酮IIA、丹参新酮、左旋二氢丹参酮I、丹参酚等。此外，尚含原儿茶醛、原儿茶酸、琥珀酸、熊果酸、乳酸、维生素E等。目前丹参药材的质量控制方法主要有：以丹参酮ⅡA(C₁₉H₁₈0₃)、丹酚酸B(C₃₆H₃₀0₁₆)的含量测定作为含量测定方法《中华人民共和国药典2010版一部》；杨树声采用HPLC法同时测定丹参类药材中水溶性活性成分的含量（甘肃中医学院学报 ，2008年 06期）；王伟采用反相高效液相色谱法同时测定丹参药材中丹参素(Ⅰ)、迷迭香酸(Ⅱ)、紫草酸(Ⅲ)、丹酚酸B(Ⅳ)的含量（安徽医药, Anhui Medical and Pharmaceutical Journal， 2010年 11期）；宋洁瑾通过建立丹参药材的指纹图谱,对不同产地丹参药材质量进行评价（辽宁中医杂志, 2008年 03期）。黄芪为豆科植物蒙古黄芪Astragalusmembranaceus (Fisch)Bge.var.mongholicus(Bge)Hsiao或膜荚黄芪Astragalusmembranaceus (Fisch)Bge.的干燥根。黄芪含黄酮、皂苷类成分；黄酮类成分如芒柄花素、3'-羟基芒柄花黄素（毛蕊异黄酮）及其葡萄糖苷、2',3'-二羟基-7,4'-二甲氧基异黄酮、7,2'-二羟基-3',4'-二甲氧基异黄烷及其葡萄糖苷、7,3'-二羟基- 4',5'- 二甲氧基异黄烷、3-羟基-9,10-二甲氧基紫檀烷及其葡萄糖苷等；皂苷类成分有黄芪皂苷Ⅰ～Ⅷ及大豆皂苷Ⅰ；黄芪甲苷（即黄芪皂苷IV）与黄芪乙苷。中国药典2010版黄芪以黄芪甲苷(C₂₂H₂₂0₁₀)、毛蕊异黄酮葡萄糖苷(C₂₂H₂₂O₁₀)为指标进行含量测定；李颜建立高效液相色谱法测定黄芪饮片中4个异黄酮成分毛蕊异黄酮-7-葡萄糖苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素的含量方法（中国药师,2012年 02期）；王宗权采用HPLC-ELSD法测定不同产地黄芪药材中的黄芪皂苷Ⅰ、黄芪皂苷Ⅱ和黄芪皂苷Ⅳ的含量（药物分析杂志, 2010年 07期）；红花为菊科植物红花Carthamustinctorius L.的干燥花。中国药典2010版以羟基红花黄色素A、山柰素(C₁₅H₁₀0₆) 为指标进行含量测定；姚苗苗采用RP-HPLC法同时测定红花中羟基红花黄色素A与红花黄色素A的含量（药物分析杂志, 2010年 02期）；范莉用HPLC方法建立红花药材的标准指纹图谱（中国实验方剂学杂志, 2011年 01期）。