[发明专利]一种免疫增强剂、灭活疫苗及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及生物制药领域，具体涉及一种免疫增强剂、灭活疫苗及其制备方法。

背景技术

口蹄疫（Foot and moush disease, FMD）是由口蹄疫病毒（Foot-and-Mouth Disease Virus, FMDV）引起的一种使偶蹄类动物发生的急性、热性高度接触性的传染病。目前世界上很多国家都有这种疾病的流行，对畜牧业造成极大地经济损失。而且该病的隐性感染可以使患病动物的生产能力下降，造成巨大的经济损失，我国将其列为第一类动物疾病。

目前，国际上在口蹄疫的防控上主要采取两种措施：紧急捕杀和免疫预防。在我国主要采取强制免疫预防，而对于急性爆发区采取封锁捕杀政策。

疫苗的免疫注射是我国目前预防口蹄疫的主要措施，但现在使用的口蹄疫疫苗主要以灭活疫苗为主，现有的灭活疫苗的缺点也很明显，在使用中存在疫苗免疫后抗体产生慢、抗体水平低、抗体持续期短及对变异毒株保护力差的缺点。兰兽研资料表明，口蹄疫灭活疫苗免疫后40天抗体才能达到有效保护水平，抗体有效期只能维持90天。冉多良等调查发现当前猪口蹄疫疫苗免疫30天后，抗体合格率仅在26%-60%之间。曹波等研究表明猪O型口蹄疫灭活疫苗免疫后3个月抗体效价水平明显下降，免疫保护率仅为67.77%；与孟国庆等研究结果一致（66.7%）；另外，李云岗等检测了3个厂家的O型疫苗抗体水平，结果免疫后3个月基本下降到免疫保护临界值。所以在实际应用中，需要对免疫动物进行多次免疫，这些缺点不但造成了严重的经济损失，也不利于口蹄疫的疫情防控。

猪流行性腹泻是由猪流行性腹泻病毒引起猪的一种急性肠道传染病。该病由猪流行性腹泻病毒感染猪而引起，以发热、厌食、水样腹泻、呕吐、严重脱水、消化道黏膜发炎及糜烂和食欲下降为主要特征，俗称冬季拉稀病。该病己成为世界流行性的疾病，是各养猪国家导致仔猪早期死亡的重要疫病之一。给养猪业造成严重的经济损失。猪流行性腹泻的灭活疫苗为铝胶佐剂，抗体产生期长，窗口期长，在冬季给免疫后未产生抗体的易感猪健康带来极大的风险。

猪圆环病毒病是主要由猪2 型圆环病毒（PCV2）引起的免疫抑制性疾病，表现为断奶后仔猪多系统衰竭综合征（PMWS）、猪皮炎肾病综合征（PDNS）、猪呼吸道疾病综合征（PRDC）、繁殖障碍、仔猪心肌炎、增生性和坏死性肺炎、饲料报酬低、死亡率上升等。现有猪圆环病毒灭活苗，副反应较大，且需要免疫后3周加强免疫，给猪体带来严重的外界刺激。

发明内容

本发明的目的是提供一种免疫增强剂，能够显著提高免疫动物对抗原的免疫应答，提高抗体水平，从而提高疫苗的免疫效果，同时能够缩短免疫窗口期，延长保护期。

本发明的另一目的是提供含有所述免疫增强剂的灭活疫苗，其免疫后抗体水平高，免疫效果好，免疫窗口期短，保护期延长。

本发明的目的是提供上述灭活疫苗的制备方法，该方法简单方便，成本低。

一种免疫增强剂，所述免疫增强剂含有0.1-21mg/mL的单磷酰脂质A、1.5-125mg/mL的胞壁酰二肽和0.7-4.5mg /mL的β-葡聚糖。

所述免疫增强剂为油乳剂。

所述油乳剂的制备方法如下：

（1）配制水相溶液：将含有单磷酰脂质A、胞壁酰二肽和β-葡聚糖的母液与吐温-80混合，得到成水相溶液；

（2） 配制油相溶液：将白油和司盘-80混合，得到油相溶液；

（3） 将所述水相溶液与油相溶液混合乳化后，得所述兽用免疫增强剂。

一种含有所述免疫增强剂的灭活疫苗。

所述灭活疫苗还包括灭活的抗原溶液。

所述灭活疫苗还包括油相溶液。

所述免疫增强剂与灭活的抗原溶液组成了水相溶液，所述水相溶液与油相溶液的体积比为46:40-60；所述水相溶液中免疫增强剂与灭活的抗原溶液的体积比为1:1-3。

所述油相溶液为ISA206。

所述灭活的抗原溶液为灭活的猪O型口蹄疫病毒液、猪圆环病毒2型病毒液和猪流行性腹泻病毒液。

一种所述灭活疫苗的制备方法，将免疫增强剂与灭活的抗原溶液混合，得到水相溶液；将水相溶液与油相溶液混合，得到灭活疫苗。

本发明免疫增强剂由于其组分之间的协同效应，提高机体的免疫水平、对抗原的免疫应答，从而提高免疫后的抗体水平、缩短免疫窗口期，增强疫苗的免疫效果。

本发明含有免疫增强剂的灭活疫苗，免疫后产生的抗体水平高，保护期长，免疫窗口期短。

本发明含有免疫增强剂的灭活疫苗的制备方法简单，易操作，成本低。