[发明专利]一种检测猪生长性能杂种优势的方法及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及畜牧学和分子生物学领域，特别是涉及一种检测猪生长性能杂种优势的方法及其应用。

背景技术

猪生长快慢是衡量养猪经济效益的重要指标，属于中等遗传力，受基因的非加性效应影响较大，存在较高的杂种优势，猪业生产中常常利用杂种优势效应来提高生产效率。杂种优势受到诸多因素影响，利用起来极其不便，对杂种优势的预测研究一直是个热点问题。目前，杂种优势预测的方法主要有群体方差比较法、遗传距离预测法、线粒体混合试验法、蛋白质多态性预测法以及分子标记法等等，其中采用分子生物学方法是最具应用前景的有效方法之一，引来研究者的关注，但至今还没有获得实质性突破。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种可用于检测猪生长性能杂种优势的方法及其应用。

本发明提供了一种检测猪生长性能杂种优势的引物对，所述引物对的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示。

本发明提供了一种检测猪生长性能杂种优势的方法，包括如下步骤：

(1)提取待测亲本猪的基因组DNA；

(2)以待测亲本猪的基因组DNA为模板，以序列表中SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示的DNA分子为引物对，进行PCR扩增，测定其PCR产物的测序；

(3)检测亲本猪的基因型，杂交后确定杂种猪的基因型

检测亲本猪PCR产物序列的第27、86和388三个特定位点的碱基组成，确定亲本猪的基因型，两亲本杂交后，杂种猪的该三个位点的碱基排列形成CTTCGA、CTTCGG、CCTCGG或CCTCGA基因型时，杂种猪分别为H1、H2、H3或H4猪；

(4)确定基因型与猪杂种优势的相关性

以两个亲本猪杂交获得H1猪具有较高生长性能杂种优势，不同基因型猪生长性能杂种优势大小为H1＞H2＞H3＞H4。

本发明所述检测猪生长性能杂种优势的方法在猪的育种中的应用。

本发明所述检测猪生长性能杂种优势的方法，其中所述检测的三个特定位点连锁，前中后分别相距为59bp和302bp，检测的方法为PCR产物测序。

本发明所述检测猪生长性能杂种优势的方法在猪的育种中的应用，包括如下步骤：采用本发明所述的方法检测猪，分别获得亲本猪，以所述亲本猪为亲本进行杂交，获得具有较高生长性能杂种优势的H1、H2、H3和H4猪，四种基因型的杂交猪都具有杂种优势。

本发明所述引物对在猪的育种中的应用。

本发明所述含有权利要求1所述引物对的试剂盒，其中包括本发明所述方法的引物对，所述引物对如序列表中SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示，所述试剂盒还包括常用的10×PCR缓冲液、dNTPs、Taq DNA聚合酶、超纯水等。

本发明检测猪生长性能杂种优势的方法，与现有技术的不同之处在于，能通过简单的PCR扩增产物测序确定待测猪的基因型，从而选出杂种优势较大的猪的亲本品系；本发明所述方法只需检测一次，确定亲本的基因型，就可以确定其杂交后代是否具有杂种优势，省去了亲本配合力反复测定的麻烦，省时省力；只需取得一部分组织(如表皮、耳组织、血液、毛发等)测定待测猪的基因型就可以测定其基因型，在待测猪的任何发育时期都可以进行，还可以早期选种和杂种优势预测；测定方法简便易行，所用时间短，结果准确，精确度高。

下面结合具体实施例对本发明所述检测猪生长性能杂种优势的方法作进一步说明。

具体实施方式

实施例

本发明所述检测猪生长性能杂种优势的方法，具体包括如下步骤：

一、提取待测亲本猪的基因组DNA

提取我国地方品种猪(淮猪)、引入品种猪(长白猪)基因组DNA。

二、位点基因型鉴定

以提取的基因组DNA为模板，以序列表中SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示DNA序列为引物进行PCR扩增。

PCR扩增体系：总体系25μL，引物各1.0μL(10μM/L)，10×PCR缓冲液2.5μL，2mM/LdNTPs2.0μL，5U/μL Taq DNA聚合酶0.5μL，100ng/μL模板1.0μL，其余用超纯水补齐。

PCR扩增条件94℃预变性5min；94℃变性30s，63℃退火30s，72℃延伸45s，30个循环，最后72℃延伸10min，4℃保存。

对PCR产物进行测序。