[发明专利]弗氏链霉菌发酵生产泰乐菌素的培养基及发酵方法

说明书

技术领域

本发明属于发酵技术领域，特别是涉及一种弗氏链霉菌发酵生产泰乐菌素的培养基及发酵方法。

背景技术

泰乐菌素又称泰乐霉素，是由放线菌属弗氏链霉菌经发酵提取而得到的一种大环内酯类抗生素，有泰乐菌素碱、磷酸盐和酒石酸盐三种形态。泰乐菌素是一种禽、畜专用的高效、无残留抗菌促生剂。对鸡败血症、猪流行性肺炎等疾病有独特的疗效，且对禽、畜的生长具有明显的促进作用。泰乐菌素作为动物专用抗生素，避免了人畜共用抗生素易产生交叉耐药性的问题，用于防治猪、禽支原体病。

国内泰乐菌素生产方法主要是发酵法，采用弗氏链霉作为菌种，以鱼粉和豆油为原料的传统方法生产，作为传统发酵工艺的培养基典型配方为：鱼粉1～1.5％，豆饼粉0.5～1％，玉米粉1～1.2％，玉米蛋粉0.5～1％，碳酸钙0.2～0.3％，甜菜碱盐酸盐0.05～0.1％，磷酸氢二铵0.04～0.06％，氯化钾0.09～0.11％，氯化钠0.09～0.11％。发酵结束后，泰乐菌素发酵单位在10000～12000u/ml；发酵周期控制在180～200h；泰乐菌素A组分控制在80～85％。由于采用豆油、鱼粉为主要原料，发酵单位低；生产周期长；生产成本较高，其中豆油成本占总成本的60％左右，鱼粉成本占总成本的15％左右。

发明内容

本发明目的就在于克服上述现有技术的缺陷，提供一种有效提高发酵单位，缩短发酵周期，同时最大限度的降低原辅料入豆油、鱼粉用量，降低生产成本，且原辅料来源不受环境影响，保证其供应充足，实现泰乐菌素稳定、高效地生产的弗氏链霉菌发酵生产泰乐菌素的培养基。

本发明的另一目的是提供利用上述培养基生产泰乐菌素的发酵方法。

为实现上述目的所采取的技术方案为：

一种弗氏链霉菌发酵生产泰乐菌素的培养基，包括一级种子培养基、二级种子培养基和发酵培养基，其特征在于上述一级种子培养基中含有花生饼粉和玉米油，二级种子培养基和发酵培养基中均含有混合鱼粉、花生饼粉和玉米油。

上述一级种子培养基的组成为：玉米油15～20ml/L、玉米蛋白粉10～20g/L、花生饼粉15～20g/L、玉米浆2～3g/L、磷酸氢二铵0.3～0.4g/L、碳酸钙1～2g/L。

上述二级种子培养基的组成为：玉米油15～20ml/L、玉米蛋白粉10～20g/L、花生饼粉15～20g/L、磷酸氢二铵0.3～0.4g/L、碳酸钙1～2g/L、混合鱼粉10～15g/L、玉米浆2～3g/L。

上述发酵培养基的组成为：玉米油25～30ml/L、玉米蛋白粉20～22g/L、花生饼粉10～12g/L、混合鱼粉6～8g/L、磷酸氢二铵0.1～0.2g/L、碳酸钙2.5～3g/L、盐酸甜菜碱0.6～0.8g/L、氯化钴0.005～0.007g/L、氯化钾0.9～1g/L、氯化钠0.9～1g/L、硫酸镁0.8～0.9g/L。

一种利用上述培养基的发酵方法，其工艺步骤包括：

1)一级种子培养：首先将一级种子培养基灭菌，冷却，并用无菌空气保压(压力0.01～0.02MPa)，然后在火焰保护下，将已经培养好的弗氏链霉菌母瓶发酵液接入一级种子罐中进行培养，接种量控制在培养基体积的5-10％；培养条件为：

a罐压0.02～0.04MPa；

b罐温28～32℃；

c空气流量：0～12h：50～60m³/h；12h～移种：120～130m³/h；

d搅拌转速100～120r/min；

e pH值6～8；

f 一级种子液停止培养，菌体浓度15～25％；

g镜检无杂菌；

h培养时间20～30h；

2)二级种子培养：先将二级种子培养基灭菌，冷却，并用无菌空气保压(压力0.01～0.02MPa)，然后将一级种子液全部移入二级种子罐进行培养；培养条件为：

a罐压0.02～0.04MPa；

b罐温28～33℃；

c空气流量1000～1100m³/h；

d搅拌转速150～160r/min；

e pH 6～8；

f二级种子液停止培养，菌体浓度30～40％；

g镜检无杂菌；

h培养时间30～40h；