[发明专利]毛细管酶阵列微反应器及应用

权利要求书

1.一种毛细管酶阵列微反应器，其特征在于：包括至少一根毛细管以及在单一毛细管样品进口端内壁依序分段排列具有能与底物相互作用的酶阵列，所述的毛细管为石英毛细管，内径为25-220um；所述的酶阵列分段集成3-10种类型的酶。

2.根据权利1所述的毛细管酶阵列微反应器，其特征在于：所述的酶通过共价键结合固定于毛细管而形成；不同酶固定在毛细管中的不同位置。

3.权利要求1或2的毛细管酶阵列微反应器，其特征在于：所述的酶阵列的总长度占毛细管的总长度为8-12%。

4.权利要求1-3任意一项所述的毛细管酶阵列微反应器的制备方法，其特征在于毛细管的一端内壁进行氨基化衍生，然后通过调节不同酶的进样压力和时间，以控制酶的固定位置从而形成阵列。

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于：首先对毛细管内壁用0.1-1mol/L的盐酸预处理10-30min，再用去离子水冲洗5-10min；接着利用毛细管电泳压力从样品进口端注入一段30-60mm的浓度为10%的3-氨丙基三甲氧基硅烷乙醇溶液，反应键合60-240min；反向通入空气去除未键合于毛细管内壁的硅烷化试剂后将毛细管进口端与出口端分别置于去离子水中3-10min进行清洗；然后压力进样注入第一段浓度为4-8u/ml的固定酶溶液，长度为5-15mm，接着正向注入空气将酶推入到距离进样口较远一端与3-氨丙基三甲氧基硅烷孵化反应10-20min；反向通入空气推出后多余的酶溶液并清洗毛细管进口端；重复以上固定步骤，将其它酶依次注入到毛细管内形成单独区段的酶阵列；酶阵列孵化60min以上后反向通入空气去除未键合的酶；最后将毛细管进口端与出口端分别置于去离子水中3-10min进行清洗并采用pH为7.5-9.5、浓度为50-200mmol/L的缓冲液冲洗1-10min。

6.权利要求1-3任意一项所述的毛细管酶阵列微反应器在检测酶与底物相互作用中的应用，其特征在于：基于毛细管电泳技术和液相色谱技术同时实现多种酶与底物的相互作用的检测。

7.权利要求1-3任意一项所述的毛细管酶阵列微反应器在同时应用于多种酶抑制剂的高通量筛选中的应用，其特征在于：基于毛细管电泳技术和液相色谱技术相结合进行筛选。