[发明专利]一种芳基萘型木脂素在治疗丙型病毒性肝炎(HCV)中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及天然药物化学领域。具体的，涉及一种芳基萘型木脂素在治疗丙型病毒性肝炎(HCV)方面的应用。 

背景技术

广西特色壮药红鱼眼Phyllanthus retIIculatus系大戟科叶下珠属植物，在壮族医药中，红鱼眼常用于治疗肝炎、风湿关节痛等症。 

丙型肝炎(hepatitisC)最初被定义为输血后非甲非乙型肝炎，1989年分离和确认其病原体为丙型肝炎病毒(HCV，hepatitisC virus)，全球范围内有17亿人血清呈HCV阳性，其感染约占全球人口的3％，并有6种主要基因型的HCV，其基因组差别达到30％。我国HCV感染以II型为主，II、III混合感染也较多。HCV感染与肝脏病变密切相关，据估计约有75％的血清阳性个体会发展为慢性感染而转变为肝硬化，一些病例还可能发展为肝癌，是造成慢性肝炎、肝硬化及肝脏细胞肿瘤的主要原因之一。目前的标准治疗，包括PEG-IFN/RBV联合用药，只对过半的感染了丙型肝炎病毒(HCV)有效，且有明显的副作用，多数感染了丙型肝炎病毒(HCV)的患者的治疗效果不够理想。因此，从传统中药、植物和真菌资源中寻找新的抗HCV药物或先导化合物的研究具有较大的现实意义。 

本发明是发明人在对壮药红鱼眼开展化学分离工作中发现了新型芳基萘型木脂素(I)，通过体外抗HCV实验，证明该化合物具有抗HCV活性，可应用于丙型病毒性肝炎(HCV)的治疗，在抗丙型肝炎新药创制中有广阔的发展前景，故提出本发明。 

发明内容

本发明化合物(I)可以从壮药红鱼眼及同属植物中提取分离制备。具体步骤如下：红鱼眼药材自然阴干并适当粉碎后，用70％到100％含水低级醇类(甲醇、乙醇)，在静态或动态下，室温或加热(包括浸渍、渗漉、回流、微波等)提取，提取溶剂用量为药材的5～15倍，提取次数为1～3次，提取液过滤、减压或常压蒸馏回收醇溶剂到收集液醇含量低于10％后，继续蒸发浓缩到无醇味(相对密度1.05～1.25/80℃)、加水0.2～5倍量，充分混悬，混悬液用石油醚充分萃取，至萃取液浓缩后用香草醛-硫酸乙醇试剂检查无反应，改用乙酸乙酯充分萃取，至萃取液浓缩后用香草醛-硫酸乙醇试剂检查无反应，再改用正丁醇充分萃取，至萃取液浓缩后用香草醛-硫酸乙醇试剂检查无反应。正丁醇萃取部分除去有机溶剂，减压或常压蒸发浓缩至相对密度为1.1～1.50/80℃的浸膏，浸膏用适量甲醇溶解后，用适量硅胶(200～300目)拌样，进行硅胶柱层析，用氯仿-甲醇溶剂系统(100∶1～1∶1)进行梯度洗脱，每1/6～1/8柱体积为一个馏分，用TLC检测合并相同部分，再反复进行硅胶柱层析结合葡聚糖凝胶柱层析纯化制得新型芳基萘型木脂素(I)。 

本发明所制备的新的芳基萘型木脂素(I)结构符合下述通式： 

其中：R₁可以是-H或-CH₃或-Glu或-Glu(6→1)Ara(f)；R₂可以是-H或-CH₃或-Ara(p)；R₃可以是-H或-CH₃。(注：-Glu为吡喃葡萄糖基，-Ara(f)为呋喃阿拉伯糖基，-Ara(p)为吡喃阿拉伯糖基) 

上述芳基萘型木脂素(I)优选下述化合物1： 

经结构鉴定化合物1命名为3′，4′-methylenedioxy-4-methoxy-5-α-L-arabinofuranosyloxy-7-β-D-glucopyranosyloxy-2，7′-cycloligna-7，7′-dien-9′，9-olide，作为一个新的芳基萘型木脂素糖苷命名为红鱼眼苷B。根据本发明人研究，上述化合物1在125μg/rnl～15625μg/rnl浓度区间内对HCV复制子RNA有明显抑制效果(p＜0.01)，无细胞毒性药物浓度区间为0～3125μg/rnl。 

附图说明

图1是化合物1的¹H-NMR谱 

图2是化合物1的¹³C-NMR谱 

图3是化合物1的HSQC谱 

图4是化合物1的HMBC谱 

具体实施实例

化合物1的提取分离