[发明专利]协日嘎四味有效部位及其制备方法、质量检测方法和应用

权利要求书

1.一种协日嘎四味有效部位，其特征在于有效部位中总萜类、总酚类、总生物碱类成分百分含量的总和为5～99％，百分含量以w/w计。

2.如权利要求1所述的协日嘎四味有效部位，其特征在于有效部位中总萜类、总酚类、总生物碱类成分百分含量的总和为50～99％，百分含量以w/w计。

3.如权利要求1或2所述的协日嘎四味有效部位的制备方法，其特征在于该方法为以下任意一种方法，或这些方法的任意组合：

溶剂萃取法：取协日嘎四味复方药材饮片0.5-1.5重量份，50%-95%乙醇回流提取2-3次，溶剂用量为5～15体积份，每次提取1-2小时，减压回收溶剂，得提取物，先将提取物混悬于水中，使药材与分散后溶液体积比为1：3—1：10，以w/v计；然后用低极性的溶剂，溶剂用量为1-3倍提取物的水溶液，萃取2-4次，得到脂溶性成分；再用中等极性的溶剂，溶剂用量为1-3倍提取物的水溶液，经2-5次萃取其中的成分；与之前萃取得到的脂溶性成分混合得到协日嘎四味有效部位；

大孔吸附树脂法：取协日嘎四味复方药材饮片0.5-1.5重量份，50%-95%乙醇回流提取2-3次，溶剂用量为5～15体积份，每次提取1-2小时，减压回收溶剂，得提取物，先将提取物混悬于水中，使得药材量与分散后溶液体积比为1:10-1:2.5，以w/v计；通过相当生药量的6-10体积倍的大孔吸附树脂，吸附流速2BV/h，树脂柱径高比为1:4～1:13，以1-5倍树脂体积的水洗脱进行除杂，除杂流速为2～6BV/h；以5-12倍树脂体积的50％-70%乙醇洗脱，洗脱流速为1～3BV/h，收集50％-70%乙醇洗脱液，回收溶剂，减压干燥，再以5-12倍树脂体积的71％-90%乙醇洗脱，洗脱流速为4～9BV/h，收集71％-90%乙醇洗脱液，回收溶剂，减压干燥，将50％-70%乙醇洗脱物与71％-90%乙醇洗脱物混合即为协日嘎四味有效部位；

超临界C0₂流体萃取法：取协日嘎四味复方药材饮片0.5-1.5重量份，加30-90％甲醇，超临界流体萃取2-3次，每次提取1-3小时，溶剂用量为8L，将所得的提取物混悬于水中，然后用低极性的乙酸乙酯，萃取其中的成分，得协日嘎四味有效部位；

液-液逆流萃取法：取协日嘎四味复方药材饮片0.5-1.5重量份，50％-80%乙醇回流提取2-4次，溶剂用量为5-15体积份，每次提取1-3小时，减压回收溶剂，得提取物；先将提取物混悬于水中，然后用低极性溶剂萃取得到脂溶性成分，然后用中等极性的溶剂萃取获得其中的萜类、酚类、生物碱类成分，将脂溶性成分与萜类、酚类、生物碱类成分混合得协日嘎四味提取物；

其中协日嘎四味复方药材饮片的原料药组成为：

姜黄100-200重量份、黄柏50-130重量份、栀子60-180重量份、蒺藜100-200重量份，所述蒺藜为蒺藜科植物蒺藜TribulusterrestrisL.的干燥成熟果实经微炒制得。

4.如权利要求3所述的协日嘎四味有效部位的制备方法，其特征在于溶剂萃取法所用低极性的溶剂为石油醚、乙醚、己烷、汽油中的任意一种溶剂或任意几种溶剂的混合物；所述中等极性的溶剂为氯仿、乙酸乙酯、丙酮、正丁醇中的任意一种溶剂或任意几种溶剂的混合物。

5.如权利要求3所述的协日嘎四味有效部位的制备方法，其特征在于大孔吸附树脂法中所用的大孔树脂是非极性、弱极性、中等极性、弱碱性或弱酸性任意一种类型。

6.如权利要求5所述的协日嘎四味有效部位的制备方法，其特征在于大孔吸附树脂法中所用的大孔树脂是弱极性或中等极性的树脂。

7.如权利要求3所述的协日嘎四味有效部位的制备方法，其特征在于大孔吸附树脂法所得50％-70%乙醇洗脱物与71％-90%乙醇洗脱物,液-液逆流萃取法所得脂溶性成分与萜类、酚类、生物碱类成分，其混合方式为直接混合；或者是用β-环糊精包合或用磷酸氢钙吸收后再混合，具体为：将71％-90%乙醇洗脱物用β-环糊精包合或用磷酸氢钙吸收后再与50％-70%乙醇洗脱物混合，β-环糊精与71％-90%乙醇洗脱物量为4:1～6：1，包合温度为65～75℃，包合时间为1.5-3小时；或将脂溶性成分用β-环糊精包合或用磷酸氢钙吸收后再与萜类、酚类、生物碱类成分混合，β-环糊精与脂溶性成分量为4:1～6：1，包合温度为65～75℃，包合时间为1.5-3小时。