[发明专利]一种抗CD20抗体-海兔毒素偶联物及其制备方法和应用有效
| 申请号： | 201310046396.9 | 申请日： | 2013-02-05 |
| 公开（公告）号： | CN103145847A | 公开（公告）日： | 2013-06-12 |
| 发明（设计）人： | 陈枢青;李朝辉;张骞;徐晓倩 | 申请（专利权）人： | 浙江大学 |
| 主分类号： | C07K19/00 | 分类号： | C07K19/00;A61K38/07;A61K47/48;A61P35/00;C07K1/107 |
| 代理公司： | 杭州天勤知识产权代理有限公司 33224 | 代理人： | 胡红娟 |
| 地址： | 310027 浙*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 cd20 抗体 海兔 毒素 偶联物 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种抗CD20抗体-海兔毒素偶联物，其特征在于，由海兔毒素通过连接臂偶联抗CD20抗体构成。
2.如权利要求1所述的抗CD20抗体-海兔毒素偶联物，其特征在于，所述抗CD20抗体的轻链氨基酸序列如SEQ ID No.1所示，重链氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。
3.如权利要求1所述的抗CD20抗体-海兔毒素偶联物，其特征在于，所述连接臂为马来酰亚胺修饰的缬氨酸-瓜氨酸二肽。
4.如权利要求1所述的抗CD20抗体-海兔毒素偶联物，其特征在于，每个抗CD20抗体分子偶联1~2个海兔毒素分子。
5.如权利要求1~4任一所述的抗CD20抗体-海兔毒素偶联物在制备抗肿瘤药物中的应用。
6.一种抗CD20抗体-海兔毒素偶联物的制备方法，包括：
（1）将抗CD20抗体与带连接臂的海兔毒素混合，进行偶联反应；
（2）反应完成后，分离纯化得到所述抗CD20抗体-海兔毒素偶联物；
所述抗CD20抗体的轻链氨基酸序列如SEQ ID No.1所示，重链氨基酸序列如SEQ ID No.2所示；
所述连接臂为马来酰亚胺修饰的缬氨酸-瓜氨酸二肽。
7.如权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述偶联反应的温度为4℃以下，时间为60~120min。
8.如权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述分离纯化方法为：利用超滤除去反应液中分子量低于10kDa的物质，再经离心去沉淀，将所得上清过滤除菌，即为所述抗CD20抗体-海兔毒素偶联物。
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