[发明专利]一种汞离子荧光检测方法和试剂盒无效
申请号: | 201310047271.8 | 申请日: | 2013-01-24 |
公开(公告)号: | CN103293135A | 公开(公告)日: | 2013-09-11 |
发明(设计)人: | 孙涛;何珏;张林志;谢晏讷;项序武;洪小兰;姚小燕;吴文鹤;吕建新 | 申请(专利权)人: | 温州医学院 |
主分类号: | G01N21/64 | 分类号: | G01N21/64 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 325035 浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 离子 荧光 检测 方法 试剂盒 | ||
1.一种汞离子的荧光检测方法,其特征在于,依次包括以下步骤:
(1)将荧光标记和未荧光标记的MSO、GO在缓冲液中混合,室温反应;
(2)将待测水溶液加入到上述溶液中,室温反应;
(3)用荧光分光光度计进行荧光波长曲线的扫描,观察荧光强度变化,实现溶液中汞离子的定量检测。
2.根据权利要求1所述的一种汞离子的荧光检测方法,其特征在于,将荧光标记和未荧光标记的MSO,通过非共价键(π-π叠加)作用力吸附到GO表面,实现纳米生物传感器的组装。如果溶液中不存在汞离子,荧光标记和未荧光标记的MSO会无规则卷曲,通过强烈的π-π叠加作用而吸附于GO的表面,使得标记于MSO末端的荧光基团由于染料与GO之间的高效电子或能量转移而严重猝灭;如果溶液中存在汞离子,这两种MSO会与汞离子形成T-Hg2+-T的结构,使荧光标记的MSO从GO表面释放和荧光信号得到恢复。所以通过检测溶液中荧光信号的变化情况,可以实现溶液中汞离子的定量检测。
3.根据权利要求1所述的一种汞离子的荧光检测方法,其特征在于,步骤(1)所述的荧光标记和未荧光标记的MSO的序列分别为5’-TTCTTTCTT-3’和5’-TTGTTTGTT-3’。
4.根据权利要求1所述的一种汞离子的荧光检测方法,其特征在于,步骤(1)所述的MSO的浓度均为1μM,荧光标记的染料为荧光素。
5.根据权利要求1所述的一种汞离子的荧光检测方法,其特征在于,步骤(1)所述的GO用量为5μl,浓度为0.5g/L。
6.根据权利要求1所述的一种汞离子的荧光检测方法,其特征在于,步骤(1)所述的缓冲液为含有100mM NaCl、5mM KCl、5mM MgCl2的Tris-HCl缓冲液,PH为7.4,Tris-HCl浓度为20mmol/L。
7.根据权利要求1所述的一种汞离子的荧光检测方法,其特征在于,步骤(1)所述的室温反应时间为5分钟。
8.根据权利要求1所述的一种汞离子的荧光检测方法,其特征在于,所有步骤均需在避光条件下进行。
9.根据权利要求1所述的一种汞离子的荧光检测方法,其特征在于,步骤(2)所述的室温反应时间为30分钟。
10.根据权利要求1所述的一种汞离子的荧光检测方法,其特征在于,步骤(3)所述的荧光波长扫描,所用的激发波长为480nm,发射波长为522nm。
11.一种用于特异性检测汞离子检测的MSO/GO试剂盒,其特征在于,试剂盒中含有:
(1)GO,浓度为0.5g/L;
(2)荧光标记和未荧光标记的MSO,浓度均为1μmol/L;
(3)含有金属离子的Tris-HCl缓冲液,浓度为20mM,PH为7.4;
(4)阳性对照溶液和阴性对照溶液;
(5)说明书。
12.根据权利要求1所述的特异性检测汞离子的MSO/GO试剂盒,其特征在于,步骤(4)所述的阳性对照溶液为10μmol/LHgCl2溶液,阴性对照为去离子水。
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